本文關鍵詞：Notch信號通路在姜黃素介導光動力治療宮頸癌的作用機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：宮頸癌(Cervical cacer)以其發(fā)病率高、死亡人數(shù)多,已成為當今危害女性生命的第二大惡性腫瘤,僅次于乳腺癌,是目前醫(yī)學領域研究的重要課題之一。本實驗運用光動力療法(photodynamic therapy, PDT),結(jié)合傳統(tǒng)光敏性中藥-姜黃素,共同研究其對宮頸癌體外移植瘤的影響。并探討姜黃素聯(lián)合光動力治療宮頸癌的作用機制,為臨床治療宮頸癌提供借鑒。目的：1.體外培養(yǎng)宮頸癌Me-180細胞,構(gòu)建宮頸癌體外移植瘤模型2.驗證姜黃素介導的PDT療法對宮頸癌體外移植瘤的影響3.闡明姜黃素-PDT治療宮頸癌的作用機制方法：將宮頸癌Me-180細胞懸液接種于BALB/C裸鼠背部皮下,每只接種100μL,經(jīng)過2-3天潛伏期,接種處可見一豆粒大小的移植瘤出現(xiàn),呈圓形或橢圓形結(jié)節(jié)狀,提示宮頸癌體外移植瘤模型建立成功。造模成功率為100%。當腫瘤直徑達到約0.8-1.Ocm時,進行后續(xù)試驗。實驗分為5組,分別為模型組、單獨光照組、姜黃素組、姜黃素-PDT組以及阻斷劑組。每組12只,共60只。其中模型組：腫瘤局部注射100 μ L生理鹽水,余不做任何處理。單獨PDT組：腫瘤局部注射100 μL生理鹽水,給予435nm波長,照射劑量為100J/cm2的光照,光纖末端距離腫瘤表面2-3cm,照射面積約為1cm2,照射時間為20min。姜黃素組：在腫瘤局部注射濃度為50 μ M/L的姜黃素溶液100μL,給予自然光照。姜黃素-PDT組：在腫瘤局部注射濃度為50 μ M/L的姜黃素溶液100uL,給藥后6小時行PDT治療。阻斷劑組：按照100mg/kg的計量,隔天腹腔注射Notch信號特異性阻斷劑DAPT溶液,PDT前6小時給予腫瘤局部注射濃度為50μmol/L的姜黃素溶液100 μL,6小時后行PDT照射治療。在治療一天后,處死6只裸鼠,余下6只繼續(xù)記錄腫瘤體積大小。通過計算各組腫瘤體積,觀察不同時間點及各組間腫瘤體積的變化。制備腫瘤石蠟切片,觀察各組HE染色結(jié)果。免疫組織化學法觀察各組中Notch-1、NF-κB以及VEGF的表達變化。Westen-blot檢測各組中Notch-1、NF-κB以及VEGF的表達變化。結(jié)果：1.在注入宮頸癌Me-180細胞懸液后1-2天,接種部位可見一米粒大小的腫物,隨著時間逐漸增大,提示造模成功。2.姜黃素聯(lián)合光動力療法對宮頸癌體外移植瘤體積的影響：各組間相同時間點比較：治療后模型組腫瘤體積呈增大趨勢,與模型組相比,姜黃素組與姜黃素聯(lián)合光動力治療組在1天時腫瘤體積有統(tǒng)計差異(P0.05)；第3天時各組與模型組均有統(tǒng)計差異(P0.05),其中姜黃素組與姜黃素+PDT組有顯著差異(P0.01)；第7天各組均有統(tǒng)計差異(P0.05),其中單純光照組與姜黃素聯(lián)合光動力治療組有顯著差異(P0.01)；第14天姜黃素組有統(tǒng)計差異(P0.05),姜黃素聯(lián)合光動力治療組差異顯著(P0.01)。第21天姜黃素組有統(tǒng)計差異(P0.05),姜黃素聯(lián)合光動力治療組有顯著差異(P0.01)。組內(nèi)不同時間點比較：與治療前腫瘤體積相比,模型組從第14天開始有統(tǒng)計差異,21天差異顯著；單純光照組第14天時有統(tǒng)計差異,21天差異顯著；姜黃素組第14天時有統(tǒng)計差異,21天差異顯著；姜黃素+PDT組：21天時有顯著統(tǒng)計差異。3.HE染色結(jié)果：模型組鏡下可見腫瘤細胞呈巢狀排列,細胞成分相對單一,核漿比較大,細胞邊界不清,核大小不等,呈圓形及卵圓形,染色質(zhì)粗糙,核分裂像常見,偶見壞死。與模型組相比,各治療組鏡下細胞排列較稀疏,體積縮小,核漿比減少,部分細胞核固縮,可見泡狀核和核周空暈,核分裂像較模型組少見,其中以PDT-姜黃素組最為明顯。4.免疫組化結(jié)果：模型組Notch-1表達較高,與模型組相比,各組Notch-1表達均降低,有統(tǒng)計學意義(P0.01)。模型組NF-kB表達較低,其余各組較模型組相比,NF-KB表達均有統(tǒng)計差異(P0.01)。與姜黃素-PDT組相比,阻斷劑組NF-kB表達顯著下降,有統(tǒng)計差異(P0.05)。模型組VFGF表達較低,其余四個治療組較模型組相比,表達均升高,有統(tǒng)計學差異(P0.01),其中姜黃素聯(lián)合光動力治療組表達最為顯著(P0.01)。與姜黃素聯(lián)合光動力治療組相比,阻斷劑組VEGF表達顯著下降,有統(tǒng)計差異(P0.01)。5. Westen-blot結(jié)果：與模型組相比,姜黃素聯(lián)合光動力治療組Notch-1表達較模型組顯著降低,有統(tǒng)計學差異(P0.01)。與姜黃素聯(lián)合光動力治療組相比,阻斷劑組Notch-1表達升高,有統(tǒng)計差異(P0.01)。與模型組相比,姜黃素聯(lián)合光動力治療組NF-kB表達降低(P0.05)。與姜黃素聯(lián)合光動力治療組相比,阻斷劑組NF-kB表達升高(P0.05)。與模型組相比,姜黃素聯(lián)合光動力治療組較模型局表達顯著升高,具有統(tǒng)計學差異(P0.01),阻斷劑組表達較模型組有所升,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與姜黃素-PDT組相比,阻斷劑組VEGF表達有所降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論：1.光動力療法對宮頸癌體外移植瘤具有抑制作用。2.治療各組Notch-1表達均較模型組降低,提示抑制Notch-1的表達可能對腫瘤增長抑制作用。3. Notch-1/NF-KB/VEGF信號通路在宮頸癌中扮演重要角色。
【關鍵詞】：宮頸癌 光動力治療 姜黃素 Notch-1 NF-κB VEGF
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 中英文縮略詞12-14
• 上篇 文獻綜述14-24
• 綜述 光動力療法治療宮頸癌的研究進展14-24
• 1 宮頸癌嚴重危害婦女健康14
• 2 光動力療法有望成為新的治療手段14-15
• 2.1 光動力療法的歷史回顧14-15
• 2.2 光動力療法的原理及特點15
• 2.3 光敏劑的發(fā)展15
• 3 光動力治療宮頸癌的研究15-18
• 3.1 光動力治療宮頸癌的可行性分析15-16
• 3.2 光動力治療宮頸癌的相關研究16
• 3.3 光動力治療宮頸癌的機制探究16-18
• 4 光動力治療宮頸癌應用于臨床的相關研究18
• 5 光動力治療非腫瘤性疾病18-19
• 6 展望19-20
• 參考文獻20-24
• 下篇 實驗研究24-71
• 前言24-25
• 整體實驗流程框架示意圖25-26
• 實驗一 姜黃素介導的光動力療法對宮頸癌體外移植瘤的作用26-38
• 1 材料26-27
• 2 方法27-29
• 3 結(jié)果29-32
• 4 討論32-35
• 5 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-38
• 實驗二 姜黃素介導的光動力療法對宮頸癌體外移植瘤中Notch-1表達情況的影響38-57
• 1 材料38-40
• 2 方法40-43
• 3 結(jié)果43-45
• 4 討論45-51
• 5 結(jié)論51-52
• 參考文獻52-57
• 實驗三 姜黃素介導的光動力治療宮頸癌體外移植瘤Notch-1下游NF-κB及VEGF的影響57-71
• 1 材料57
• 2 方法57-58
• 3 結(jié)果58-63
• 4 討論63-67
• 5 結(jié)論67-68
• 參考文獻68-71
• 結(jié)語71-72
• 致謝72-73
• 個人簡歷73-74
• 附圖74

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張冬;于占革;;Notch信號通路與骨髓間充質(zhì)干細胞分化的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2013年22期

2 孟曉;宋穎;劉云鵬;楊向紅;;大鼠骨髓源內(nèi)皮祖細胞分化過程Notch信號通路活化及欖香烯干預機制的探討[J];中華腫瘤防治雜志;2012年07期

3 王t

本文編號：464260