本文關(guān)鍵詞：乳源活性肽（PGPIPN）通過HSP信號(hào)途徑降低人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑的抗性的體外研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：1.探討乳源活性肽降低人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑的抗性。2.探討乳源活性肽通過HSP信號(hào)途徑降低人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑抗性的可能分子機(jī)制方法：1.培養(yǎng)人原代卵巢癌細(xì)胞并對(duì)其進(jìn)行純度鑒定2.CCK8法比較單獨(dú)使用順鉑,順鉑聯(lián)合不同濃度PGPIPN對(duì)細(xì)胞COC1, COC1/DDP和人原代卵巢癌細(xì)胞生長的抑制情況,并且篩選出藥物最佳作用時(shí)間3.用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同藥物濃度對(duì)COC1, COC1/DDP和人原代卵巢癌細(xì)胞凋亡和周期的影響4. RT-PCR檢測(cè)相關(guān)基因HSP70, HSF1, ERCC1, MDR1的表達(dá)5. Western blot檢測(cè)相關(guān)蛋白HSP70, HSF1, ERCC1, MDR1的表達(dá)結(jié)果：1.成功培養(yǎng)人原代卵巢癌細(xì)胞,通過免疫熒光法鑒定純度達(dá)到80%以上。2.通過CCK8法可知,與正常對(duì)照組相比,單獨(dú)使用順鉑,順鉑聯(lián)合不同濃度的PGPIPN組的COC1, COC1/DDP細(xì)胞,人原代卵巢癌細(xì)胞的細(xì)胞抑制率均增加。COC1/DDP組,順鉑聯(lián)合不同濃度PGPIPN比單獨(dú)使用順鉑的細(xì)胞抑制率高,且隨著PGPIPN濃度增加,抑制率也在增加,48h時(shí)IC50的DDP聯(lián)合高濃度的PGPIPN使細(xì)胞抑制率達(dá)到76.8%。而對(duì)于COC1組,聯(lián)合用藥的細(xì)胞抑制率比單獨(dú)使用順鉑的抑制率有所增加,但是不及COC1/DDP組細(xì)胞的抑制率變換大,48h最大抑制率也達(dá)到62.3%。人原代卵巢癌在48h時(shí),IC50的DDP聯(lián)合高濃度的PGPIPN使細(xì)胞抑制率達(dá)到87.6%。3.通過流式凋亡實(shí)驗(yàn),對(duì)于COC1細(xì)胞,不同濃度PGPIPN聯(lián)合順鉑的細(xì)胞凋亡率比單獨(dú)使用順鉑凋亡率略高,最大凋亡率為45.4%：對(duì)于COC1/DDP細(xì)胞,不同濃度PGPIPN聯(lián)合順鉑比單獨(dú)使用順鉑凋亡率高,其凋亡增加幅度大于COC1組最大凋亡率為67.4%；人原代卵巢癌細(xì)胞的凋亡率最大可以達(dá)到61.4%。對(duì)于周期的影響用藥后均阻止在G2/M期,且隨聯(lián)合用藥濃度增大而更加明顯。4.對(duì)于HSF1和HSP70基因在COC1, COC1/DDP細(xì)胞中,隨著聯(lián)合用藥組中PGPIPN濃度的增加,表達(dá)均減弱。而對(duì)于ERCC1和MDR1基因,在COC1細(xì)胞中,ERCC1和MDR1的表達(dá)均較弱,且隨著聯(lián)合用藥組中PGPIPN濃度的增加,表達(dá)減弱的并不明顯,在COC1/DDP細(xì)胞中隨著PGPIPN的升高,表達(dá)量明顯降低。5.HSF1和HSP70蛋白在COC1, COC1/DDP細(xì)胞中,隨著聯(lián)合用藥組中PGPIPN濃度的增加,表達(dá)均減弱。ERCC1和MDR1蛋白,在COCl細(xì)胞中表達(dá)均較弱,且隨著聯(lián)合用藥組中PGPIPN濃度的增加表達(dá)減弱的并不明顯,而在COC1/DDP細(xì)胞中隨著PGPIPN的升高,表達(dá)量明顯降低。結(jié)論：1.乳源活性肽可以降低人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑的抗性。2.其可能的分子機(jī)制是癌變過程中,HSF1的激活被抑制,HSP70的表達(dá)降低,從而降低細(xì)胞的耐藥性,ERCC1和MDR1的表達(dá)也隨之減弱。
【關(guān)鍵詞】：PGPIPN 人卵巢癌細(xì)胞 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 英文縮略表5-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-12
• 1 前言12-13
• 2 材料與方法13-23
• 3 結(jié)果與分析23-40
• 4 討論40-42
• 5 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 個(gè)人簡歷46-47
• 致謝47-48
• 綜述48-55
• 參考文獻(xiàn)53-55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魏彩;秦宜德;鄭欣;何曉光;張文曉;楊浩然;;乳源免疫調(diào)節(jié)肽體外抑制人卵巢癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移[J];中國藥理學(xué)通報(bào);2013年01期

2 張文曉;秦宜德;何曉光;鄭欣;任明強(qiáng);;乳鐵蛋白抗菌-免疫調(diào)節(jié)融合肽的載體構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達(dá)和純化[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年06期

3 于志鵬;趙文竹;劉博群;劉靜波;;血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽研究進(jìn)展[J];食品科學(xué);2010年11期

4 王興涌;范華;李棟;;生物活性肽功能和作用研究進(jìn)展[J];預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志;2009年09期

5 李素萍;郭曉婕;賈曉益;顧芳;劉忠;秦宜德;;乳源免疫調(diào)節(jié)肽對(duì)人卵巢癌SKOV_3細(xì)胞生長及凋亡的影響[J];腫瘤;2009年06期

6 朱延焱;黃繩武;;肽類藥物國內(nèi)外研究進(jìn)展[J];中國藥師;2008年07期

7 馬楠楠;郭獻(xiàn)靈;王晉;浦浩;熊海燕;宋建瑞;孫凱;李蓉;張柏和;吳孟超;衛(wèi)立辛;;胃癌耐藥細(xì)胞多藥耐藥基因表達(dá)上調(diào)中AP-1作用的研究[J];中國腫瘤臨床;2008年10期

8 徐靜波;張建友;孫培龍;孟祥河;;乳蛋白源生物活性肽的研究現(xiàn)狀[J];中國釀造;2007年07期

9 周e，

本文編號(hào)：459975