本文關(guān)鍵詞：甘露糖結(jié)合凝集素對(duì)妊娠期糖尿病孕婦外周血單個(gè)核細(xì)胞炎癥因子調(diào)節(jié)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)實(shí)驗(yàn)干預(yù)前GDM組和對(duì)照組血漿細(xì)胞因子(IL-1、IL-10和TNF-a)及蛋白(TLR4、NF-κB)的表達(dá)是否存在差異性；在此基礎(chǔ)上以1μg/mlLPS誘導(dǎo)建立GDM孕婦外周血單個(gè)核細(xì)胞的炎癥活化模型,建模成功后予不同濃度的重組MBL (0.1、0.5、1.0、2.0μg/ml)干預(yù)通過檢測(cè)細(xì)胞因子和蛋白的表達(dá)水平變化來探討其對(duì)孕婦單個(gè)核細(xì)胞的脂多糖Toll樣受體(Toll-receptor,TLR) 4/核轉(zhuǎn)錄因子-K B信號(hào)通路活性的調(diào)節(jié)作用,從而探討MBL在GDM炎癥損傷機(jī)制中的作用。方法嚴(yán)格消毒后取孕婦空腹肘靜脈血15 ml,采用密度梯度離心法分離收集血漿和單個(gè)核細(xì)胞,調(diào)單個(gè)核細(xì)胞6*106個(gè)/L分7組,其中1組用于和對(duì)照組進(jìn)行各指標(biāo)(細(xì)胞因子IL-1、IL-10、TNF-α和蛋白TLR4、NF-κB)比對(duì),余6組予LPS和不同濃度的重組MBL (0.1、0.5、1.0、2.0μg/ml)處理分別標(biāo)記為A組(未處理組)、B組(僅LPS處理組)、C組(LPS+0.1μg/ml處理組)、D組(LPS+0.5μg/ml處理組)、E組(LPS+1.0μg/ml處理組)、F組(LPS+2.0μg/ml處理組),采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme Llinked Immunosorbent Assay,ELISA)和蛋白印跡法(Western-Blot, WB)檢測(cè)各組血漿細(xì)胞因子(IL-1、IL-10和TNF-a)和細(xì)胞總蛋白(TLR4、NF-κB)的表達(dá)水平變化情況。數(shù)據(jù)分析采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、方差分析、LSD檢驗(yàn)和Pearson相關(guān)分析檢驗(yàn)方法。結(jié)果(1)GDM組血漿脂多糖水平高于對(duì)照組[(0.92±0.41)與(0.57±0.22)EU/ml,t=3.21]; MBL水平低于對(duì)照組[(254.4±123.4)與(424.8±150.4)μg/ml,t=-1.96]; IL-1和TNF-a水平均高于對(duì)照組[分別為(14.5±2.1)與(10.5±±4.0)pg/ml, (5.72±0.99)與(2.79±0.87) pg/ml, t值分別為-3.46和3.77],差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均0.05)；IL-10與對(duì)照組比較無明顯差異[為(4.4±0.9)與(3.0±1.0)pg/ml,t=-4.37],差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值≥0.05)。(2)Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示,GDM組中炎癥因子水平(IL-1、IL-10和TNF-a)與脂多糖水平均正相關(guān)(r1=0.78,r2=0.81,r=3=0.83,P值均0.05),與MBL水平呈負(fù)相關(guān)(rl=-0.71,r2=-0.51,r3=0.68,P值均0.05)；脂多糖與MBL水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.51,P0.05)。(3)GDM組與對(duì)照組孕婦單個(gè)核細(xì)胞基礎(chǔ)細(xì)胞總蛋白進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),GDM組外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR4和NF-κB蛋白表達(dá)水平均高于對(duì)照組[分別為1.85±0.41與1.27±0.72,1.20±0.62與0.84±0.31,t值分別為-13.57和-7.19,P值均0.05]。(4)細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示：采用脂多糖和不同濃度重組MBL干預(yù)后,實(shí)驗(yàn)各組均與B組進(jìn)行比較,其中與B組比較C組IL-1、IL-10、TNF-a水平及TLR4、NF-K B蛋白表達(dá)量[分別為(15.44±2.29)、(4.77±1.84)、(5.83±1.08)pg/ml及2.01±0.15、1.47±0.04],隨著重組MBL濃度的增加,D組[分別為(13.37±1.34)、(3.13±1.71)、(4.23±1.71)pg/ml及1.58±0.69、1.20±0.16]、E組[分別為(12.18±1.38)、(2.72±0.69)、(3.15±0.78)pg/ml及0.85±0.02、0.89±0.02]、F組[分別為(10.59±1.20).、(2.03±0.92)、(2.71±0.96)pg/ml及0.56±0.44、0.61±0.21]逐漸降低,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均0.05)。結(jié)論1.妊娠期糖尿病孕婦血漿脂多糖水平較高,MBL水平較低；這種病理狀態(tài)可能與GDM炎癥發(fā)病機(jī)制有關(guān)。2.妊娠期孕婦血漿MBL和脂多糖聯(lián)合細(xì)胞因子(IL-1、IL-10、TNF-a)檢測(cè)可能成為預(yù)測(cè)GDM比較有臨床價(jià)值的生化指標(biāo)。3.孕婦血漿MBL水平較低,可能導(dǎo)致對(duì)TLR4/NF-κB通路的抑制作用減弱,從而形成慢性持續(xù)性炎癥損傷,參與GDM發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：妊娠期糖尿病 甘露糖結(jié)合凝集素 脂多糖 炎癥因子
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R714.256
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 1. 前言12-16
• 2. 材料與方法16-25
• 3 結(jié)果25-29
• 4. 討論29-33
• 5. 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-39
• 附錄39-41
• 個(gè)人簡歷39-41
• 致謝41-43
• 綜述43-51
• 參考文獻(xiàn)48-51

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  本文關(guān)鍵詞：甘露糖結(jié)合凝集素對(duì)妊娠期糖尿病孕婦外周血單個(gè)核細(xì)胞炎癥因子調(diào)節(jié)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：457335