本文關(guān)鍵詞：卵巢上皮性癌中干擾素介導(dǎo)的跨膜蛋白1的表達(dá)意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景在過去的幾十年內(nèi)卵巢癌仍然是婦科腫瘤中死亡率最高的惡性腫瘤,五年生存率最低[1],超過70%的患者就診時(shí)已處于晚期,標(biāo)準(zhǔn)的手術(shù)分期和腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)聯(lián)合鉑類為基礎(chǔ)的輔助性化療,即使暫時(shí)獲得臨床完全緩解,但85-90%的患者最終仍會(huì)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[2],順鉑作為臨床一線化療的鉑類藥物主要通過交聯(lián)破壞腫瘤細(xì)胞DNA的合成及修復(fù)發(fā)揮作用,但因?yàn)槁殉舶┖苋菀桩a(chǎn)生耐藥性,實(shí)際治療中即使是最滿意的腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)和輔助化療也只達(dá)到50%的臨床緩解率及30%的病理緩解率,平均復(fù)發(fā)時(shí)間僅為18個(gè)月[3]。所以在全球范圍內(nèi)卵巢癌的早期診斷及耐藥逆轉(zhuǎn)是非常棘手和復(fù)雜的問題,尋找代表性腫瘤生物學(xué)檢測指標(biāo)顯得尤為迫切。干擾素介導(dǎo)的跨膜蛋白1(Interferon-induced transmembrane protein 1,IFITM1)屬于干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白家族中的一員,其基因產(chǎn)物是淋巴細(xì)胞上參與傳遞抗增殖和同型的抗粘附信號(hào)復(fù)合體的白細(xì)胞抗原之一[4]。IFITM1在不同的腫瘤中可上調(diào)也可缺失,作用機(jī)制均不相同。近年有關(guān)其高表達(dá)的研究報(bào)道有結(jié)腸癌、肺癌、直腸癌、胃癌及頭頸部鱗癌,它在惡性腫瘤發(fā)生、增殖、侵襲中的作用正日益受到廣泛關(guān)注[5]。在卵巢癌基因表達(dá)分析的研究中,國外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)ifitm1是最有前途的新的分子標(biāo)志物,而國內(nèi)研究尚無報(bào)道。本研究以卵巢癌組織標(biāo)本、病理切片、卵巢癌敏感細(xì)胞株a2780/卵巢癌耐藥細(xì)胞株cp70為研究對象,采用免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、實(shí)時(shí)熒光定量pcr、westernblot、mtt、流式細(xì)胞儀檢測卵巢癌組織或卵巢癌細(xì)胞中ifitm1的表達(dá)水平,研究ifitm1與卵巢癌的病理分期、腫瘤分化程度、figo(國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟)分期、腹水、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移、化療耐藥的相關(guān)性,探討ifitm1在卵巢癌早期診斷及化學(xué)治療方面的意義。并進(jìn)一步觀察經(jīng)順鉑處理a2780/cp70后ifitm1的表達(dá)水平,旨在探討ifitm1與卵巢癌化療耐藥性的相關(guān)性,為臨床預(yù)測化學(xué)治療效果提供有意義的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的1.觀察ifitm1在卵巢癌組織中的表達(dá),及其與臨床病理因素間的關(guān)系;2.觀察ifitm1表達(dá)水平與卵巢癌細(xì)胞順鉑化療耐藥之間的相關(guān)性。3.觀察ifitm1sirna對卵巢癌細(xì)胞順鉑敏感性及生物學(xué)行為的影響。方法及內(nèi)容1.以正常卵巢、卵巢良性腫瘤、卵巢交界性卵巢腫瘤和卵巢上皮性癌組織為研究對象,應(yīng)用westernblot及免疫組織化學(xué)檢測各組織中ifitm1的表達(dá),及其與臨床病理因素間的關(guān)系。2.以卵巢癌順鉑敏感細(xì)胞株a2780和卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞株cp70為研究對象,應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)、westernblot觀察ifitm1在卵巢癌細(xì)胞株中的表達(dá)。3.以順鉑處理后卵巢癌細(xì)胞株a2780/cp70為研究對象,采用實(shí)時(shí)熒光定量pcr、westernblot、mtt檢測細(xì)胞中ifitm1的表達(dá)水平,分析其與卵巢癌細(xì)胞順鉑化療耐藥之間的相關(guān)性。4.以順鉑耐藥細(xì)胞株cp70為研究對象,應(yīng)用sirna技術(shù)沉默ifitm1基因,實(shí)時(shí)熒光定量pcr,westernblot觀察轉(zhuǎn)染后ifitm1的表達(dá),mtt,細(xì)胞平板克隆,流式細(xì)胞儀,transwell法觀察ifitm1sirna對卵巢癌細(xì)胞順鉑敏感性,凋亡,增殖,侵襲等生物學(xué)行為的影響。結(jié)果1.ifitm1表達(dá)強(qiáng)度在正常卵巢、良性卵巢腫瘤組織、交界性卵巢腫瘤組織和卵巢癌組織呈逐漸升高趨勢;ifitm1的表達(dá)與上皮性卵巢癌的組織學(xué)類型、figo分期和腫瘤細(xì)胞分化程度有關(guān),與淋巴轉(zhuǎn)移、腹水無明顯相關(guān)性。晚期卵巢癌組織表達(dá)率(79.1%)較早期的表達(dá)率(73.9%)增高;隨著腫瘤細(xì)胞分化程度的降低,卵巢癌組織中的表達(dá)率逐漸增高;卵巢上皮性癌患者鉑類耐藥組中ifitm1表達(dá)強(qiáng)度高于鉑類敏感組。2.ifitm1陽性表達(dá)定位于細(xì)胞胞膜上,順鉑耐藥株cp70的ifitm1染色強(qiáng)度及蛋白表達(dá)水平較順鉑敏感株a2780增強(qiáng)。3.使用相同濃度梯度的順鉑誘導(dǎo)卵巢癌敏感株a2780和耐藥株cp70后,ifitm1蛋白的表達(dá)水平都呈現(xiàn)增強(qiáng)趨勢,并且隨順鉑劑量的增加和作用時(shí)間的延長而逐漸增強(qiáng),呈現(xiàn)出劑量及時(shí)間的同步依賴性。4.ifitm1sirna轉(zhuǎn)染cp70細(xì)胞后,ifitm1mrna及蛋白的表達(dá)下調(diào),cp70細(xì)胞的存活率降低,增殖能力降低,細(xì)胞凋亡增加,侵襲能力降低,結(jié)論1.ifitm1在卵巢癌組織中表達(dá)明顯上調(diào),提示ifitm1表達(dá)增強(qiáng)可能是卵巢癌的一個(gè)初始事件,與卵巢癌的發(fā)生密切相關(guān)。ifitm1的表達(dá)與上皮性卵巢癌的組織學(xué)類型、figo分期和腫瘤細(xì)胞分化程度有關(guān),與淋巴轉(zhuǎn)移、腹水無關(guān)。從實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)論來看,晚期卵巢癌組織和低分化的卵巢癌組織中ifitm1表達(dá)明顯增多。顯示ifitm1的表達(dá)隨著卵巢癌惡性生物學(xué)行為進(jìn)展而增強(qiáng)。提示ifitm1可能成為早期卵巢癌基因診斷和病情評估的標(biāo)志物。2.ifitm1在順鉑耐藥細(xì)胞株cp70中的表達(dá)明顯高于敏感細(xì)胞株a2780,提示ifitm1表達(dá)增高可能是卵巢癌耐藥產(chǎn)生過程中的重要生物學(xué)機(jī)制。不同濃度的順鉑分別誘導(dǎo)卵巢癌敏感細(xì)胞株a2780和耐藥細(xì)胞株cp70后,細(xì)胞株均表現(xiàn)為ifitm1蛋白水平增高,而且伴隨順鉑劑量的增高和作用時(shí)間的增加,ifitm1表達(dá)也呈現(xiàn)逐漸增強(qiáng)的趨勢,提示ifitm1參與了順鉑化療耐藥性的產(chǎn)生過程。3.IFITM1si RNA特異性沉默IFITM1的表達(dá),能夠提高卵巢癌CP70細(xì)胞對順鉑的敏感性,這提示IFITM1在卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥及其他生物學(xué)行為中發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：卵巢腫瘤 IFITM1基因 順鉑 耐藥
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-10
• Abstract10-14
• 前言14-16
• 文獻(xiàn)回顧16-22
• 實(shí)驗(yàn)一 卵巢癌組織中IFITM1的表達(dá)及其與順鉑耐藥的相關(guān)性22-32
• 1 材料22-24
• 2 方法24-27
• 3 結(jié)果27-30
• 4 討論30-32
• 實(shí)驗(yàn)二 卵巢癌細(xì)胞中IFITM1的表達(dá)及其與順鉑耐藥的相關(guān)性32-48
• 1 材料32-36
• 2 方法36-43
• 3 結(jié)果43-45
• 4 討論45-48
• 實(shí)驗(yàn)三 siRNA對卵巢癌細(xì)胞CP70順鉑敏感性及其生物學(xué)行為的影響48-60
• 1 材料48-50
• 2 方法50-53
• 3 結(jié)果53-57
• 4 討論57-60
• 小結(jié)60-61
• 參考文獻(xiàn)61-68
• 個(gè)人簡歷和研究成果68-69
• 致謝69

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 袁森;田明堯;崔鶴馨;靖杰;劉昊;劉存霞;任靜強(qiáng);姜慶利;薛斐;金寧一;;人干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR檢測方法的建立[J];中國生物制品學(xué)雜志;2013年05期

2 劉灝;林智琪;符方勇;周忠信;劉正軍;;抗IFITM1單克隆抗體的制備及檢測[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年09期

  本文關(guān)鍵詞：卵巢上皮性癌中干擾素介導(dǎo)的跨膜蛋白1的表達(dá)意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：456995