改良手術(shù)法宮腔注射骨橋蛋白在小鼠胚泡著床過(guò)程中的作用探討
本文關(guān)鍵詞:改良手術(shù)法宮腔注射骨橋蛋白在小鼠胚泡著床過(guò)程中的作用探討,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究目的:(1)探討宮腔注射OPN與小鼠胚泡著床的相關(guān)性,(2)從子宮內(nèi)膜腫瘤發(fā)生與發(fā)展的角度初步觀察宮腔注射OPN的安全性,(3)為提高ART(assisted reproductive technology,輔助生殖技術(shù))中胚胎著床的成功率提供新技術(shù)。研究?jī)?nèi)容:(1)本課題采用以6周齡性成熟ICR(Institute of Cancer Research,美國(guó)癌癥研究所)小鼠為研究對(duì)象,嘗試對(duì)經(jīng)典手術(shù)宮腔注射法進(jìn)行簡(jiǎn)化、改良,采用不同于經(jīng)典手術(shù)宮腔注射法的手術(shù)切口,即在小鼠恥骨聯(lián)合上緣0.5cm,腹部正中線處做一長(zhǎng)約1cm的手術(shù)切口,并以此進(jìn)入腹腔暴露小鼠子宮,進(jìn)行宮腔注射的改良;(2)本課題通過(guò)OPN elisa(enzyme-linked immuno sorbent assay,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒檢測(cè)宮腔注射NS、OPN前后子宮體OPN含量變化,初步探討改良手術(shù)宮腔注射法的注射效率;(3)本課題建立小鼠自然受孕模型,根據(jù)干預(yù)措施的不同將ICR小鼠按照隨機(jī)數(shù)表法隨機(jī)分組為三組:空白組、NS組、OPN組(n=8);在受孕后第四天(記為D4)進(jìn)行改良手術(shù)法宮腔注射NS、 OPN,并于受孕后第八天(D8)處死并解剖小鼠,觀察不同組小鼠的妊娠率及平均著床數(shù),探討OPN在小鼠胚泡著床中的作用:(4)本課題通過(guò)免疫組化法檢測(cè)宮腔注射后各組小鼠(n=8)D5子宮內(nèi)膜E-cad (E-cadherin,E-鈣粘蛋白)、VIM (vimentin,波形蛋白)表達(dá)水平變化,探討宮腔注射OPN對(duì)子宮內(nèi)膜細(xì)胞EMT(Epithelial-mesenchymal transition,上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換)的影響,從腫瘤的發(fā)生與發(fā)展角度初步探討宮腔注射OPN的安全性。研究結(jié)果:(1)NS組OPN含量(9.91±5.75ng/L)較空白組(16.06+3.96ng/L)略微下降,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);OPN組OPN含量(60.20±15.10ng/L)明顯高于NS組及空白組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(2)NS組妊娠率及平均著床數(shù)(12.5%,0.3±0.7)均低于空白組(75.0%,9.1±5.9)、OPN組(62.5%,4.6±4.1),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);OPN組妊娠率及平均著床數(shù)低于空白組,但妊娠率的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),平均著床數(shù)的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);(3)空白組、NS組、OPN組E-cad強(qiáng)陽(yáng)性(+++)率表達(dá)均為75%,VIM弱陽(yáng)性(+)表達(dá)率均為75%,三者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。研究結(jié)論:(1)通過(guò)改良手術(shù)宮腔注射法注射OPN可有效提高子宮OPN含量;(2)通過(guò)改良手術(shù)宮腔注射法注射NS可顯著降低小鼠妊娠率及著床數(shù);(3)宮腔注射OPN可以提高小鼠的妊娠率及胚泡著床數(shù);(4)宮腔注射OPN對(duì)小鼠子宮內(nèi)膜EMT無(wú)影響。
【關(guān)鍵詞】:OPN 子宮內(nèi)膜容受性 EMT
【學(xué)位授予單位】:東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R714
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 縮略詞注釋表9-10
- 前言10-12
- 文獻(xiàn)綜述12-17
- 第一章 實(shí)驗(yàn)材料17-19
- 1、動(dòng)物準(zhǔn)備17
- 2、主要儀器與設(shè)備17-18
- 3、主要試劑和耗材18-19
- 第二章 實(shí)驗(yàn)方法19-29
- 1、研究?jī)?nèi)容19-20
- 2、技術(shù)路線20-21
- 3、研究方法21-29
- 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析29-33
- 1、改良手術(shù)宮腔注射法的注射效率29-30
- 2、宮腔注射OPN對(duì)小鼠妊娠率及平均著床數(shù)的影響30-31
- 3、宮腔注射OPN對(duì)小鼠子宮內(nèi)膜細(xì)胞EMT的影響31-33
- 第四章 討論與結(jié)論33-37
- 第五章 展望37-39
- 參考文獻(xiàn)39-44
- 附錄44-47
- 附錄一:作者簡(jiǎn)介44-45
- 附錄二:攻讀碩士學(xué)位期間參與的研究項(xiàng)目45-46
- 附錄三:攻讀碩士學(xué)位期間獲得的研究成果46-47
- 致謝47
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本文關(guān)鍵詞:改良手術(shù)法宮腔注射骨橋蛋白在小鼠胚泡著床過(guò)程中的作用探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):451574
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