補中益氣湯對TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的影響及其治療POP的機制研究
本文關鍵詞:補中益氣湯對TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的影響及其治療POP的機制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的采用細胞分子生物學實驗的方法,研究補中益氣湯對盆腔臟器脫垂的作用機制。通過對比盆腔臟器脫垂患者與正常對照組子宮主骶韌帶中TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA表達情況,明確TGFβ-3、COL1A1、COL3A1能否作為判定相關治療是否有效的評價指標。并通過體外細胞培養(yǎng)、給藥,檢測分析TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達情況,探討補中益氣湯治療盆腔臟器脫垂的可能機制,以及應用補中益氣湯治療盆腔臟器脫垂的可能性,為臨床上補中益氣湯治療盆腔臟器脫垂提供理論依據(jù)。方法1.選取40例行經(jīng)腹或經(jīng)陰道子宮全切患者,其中符合中、西醫(yī)診斷標準盆腔臟器脫垂患者20例為研究組,非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變患者20例為正常對照組。術中取子宮主韌帶、骶韌帶各1cm*1cm,經(jīng)液氮充分研磨后提取組織RNA,實時熒光定量測定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達,并進行統(tǒng)計學分析。2.選取非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變需行經(jīng)腹子宮全切患者1例,術中采集子宮骶韌帶約1cm*1cm,進行原代細胞培養(yǎng),待細胞培養(yǎng)至第4代時,于培養(yǎng)基中加入濃度分別為20g/L、10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L、0.3125g/L的補中益氣湯。每個濃度重復3孔。加藥后第4天取加藥組及對照組細胞,提取c DNA,實時熒光定量測定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達,并進行統(tǒng)計學分析。結果組織RNA檢測結果:TGFβ-3:POP組主骶韌帶中TGFβ-3 m RNA表達水平明顯高于正常對照組;COL1A1:POP組主骶韌帶中COL1A1 m RNA表達水平明顯低于正常對照組;COL3A1:POP組主骶韌帶中COL3A1 m RNA表達水平明顯低于正常對照組。差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。主韌帶組與骶韌帶組TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達無明顯差異,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。成纖維細胞RNA檢測結果:給藥后所有濃度TGFβ-3、COL1A1、COL3A1m RNA的表達均較空白對照組上升明顯,且差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。且隨著濃度的上升,TGFβ-3、COL1A1、COL3A1m RNA的表達亦上升,濃度增加至2.5g/L時,3種因子的表達達峰值。隨著濃度的繼續(xù)升高,3種因子的表達隨之下降,但仍高于空白對照組。且補中益氣湯對TGFβ-3與COL1A1、COL3A1的調節(jié)作用相似。結論1.TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達在盆腔臟器脫垂患者與正常對照組子宮主骶韌帶中表達存在顯著差異,說明此三者與盆腔臟器脫垂存在密切關系,可以作為判定補中益氣湯對盆腔臟器脫垂患者治療是否有效的可靠指標。2.補中益氣湯對盆腔臟器脫垂的治療作用可能與調節(jié)TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達有關。但其具體作用靶點和機制尚需進一步研究。3.單獨應用補中益氣湯具有一定的可行性,臨床上可以通過大樣本的臨床試驗對此結論進行考證。
【關鍵詞】:盆腔臟器脫垂 補中益氣湯 轉化生長因子β-3 Ⅰ型膠原蛋白 Ⅲ型膠原蛋白
【學位授予單位】:湖北中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R711.2
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- Abstract7-10
- 縮略詞表10-11
- 前言11-14
- 1TGFβ-3、COL1A1、COL3A1在盆腔臟器脫垂患者子宮主骶韌帶中的表達情況14-20
- 1.1 臨床資料14-16
- 1.2 實驗研究16-20
- 2 補中益氣湯對子宮骶韌帶成纖維細胞TGFβ-3、COL1A1、COL3A1表達的影響20-30
- 2.1 取材20
- 2.2 儀器與試劑20-22
- 2.3 試劑及藥物制備22
- 2.4 試驗方法22-24
- 2.5 結果24-30
- 討論30-40
- 1 課題設計的現(xiàn)代醫(yī)學背景30-36
- 1.1 發(fā)病因素30-31
- 1.2 膠原蛋白與POP31-34
- 1.3 TGFβ與POP34-35
- 1.4 治療35-36
- 2 課題設計的中醫(yī)理論基礎36-38
- 2.1 病因病機36
- 2.2 辨證施治36-37
- 2.3 補中益氣湯與POP37-38
- 3 本課題創(chuàng)新之處38-39
- 4 本課題相關問題及進一步研究39-40
- 結語40-41
- 參考文獻41-48
- 附錄 文獻綜述48-60
- 參考文獻55-60
- 致謝60
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