補(bǔ)中益氣湯對TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的影響及其治療POP的機(jī)制研究
本文關(guān)鍵詞:補(bǔ)中益氣湯對TGFβ-3及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的影響及其治療POP的機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的采用細(xì)胞分子生物學(xué)實驗的方法,研究補(bǔ)中益氣湯對盆腔臟器脫垂的作用機(jī)制。通過對比盆腔臟器脫垂患者與正常對照組子宮主骶韌帶中TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA表達(dá)情況,明確TGFβ-3、COL1A1、COL3A1能否作為判定相關(guān)治療是否有效的評價指標(biāo)。并通過體外細(xì)胞培養(yǎng)、給藥,檢測分析TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達(dá)情況,探討補(bǔ)中益氣湯治療盆腔臟器脫垂的可能機(jī)制,以及應(yīng)用補(bǔ)中益氣湯治療盆腔臟器脫垂的可能性,為臨床上補(bǔ)中益氣湯治療盆腔臟器脫垂提供理論依據(jù)。方法1.選取40例行經(jīng)腹或經(jīng)陰道子宮全切患者,其中符合中、西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)盆腔臟器脫垂患者20例為研究組,非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變患者20例為正常對照組。術(shù)中取子宮主韌帶、骶韌帶各1cm*1cm,經(jīng)液氮充分研磨后提取組織RNA,實時熒光定量測定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達(dá),并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。2.選取非卵巢功能性腫瘤及宮頸上皮內(nèi)瘤變需行經(jīng)腹子宮全切患者1例,術(shù)中采集子宮骶韌帶約1cm*1cm,進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng),待細(xì)胞培養(yǎng)至第4代時,于培養(yǎng)基中加入濃度分別為20g/L、10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L、0.625g/L、0.3125g/L的補(bǔ)中益氣湯。每個濃度重復(fù)3孔。加藥后第4天取加藥組及對照組細(xì)胞,提取c DNA,實時熒光定量測定TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達(dá),并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果組織RNA檢測結(jié)果:TGFβ-3:POP組主骶韌帶中TGFβ-3 m RNA表達(dá)水平明顯高于正常對照組;COL1A1:POP組主骶韌帶中COL1A1 m RNA表達(dá)水平明顯低于正常對照組;COL3A1:POP組主骶韌帶中COL3A1 m RNA表達(dá)水平明顯低于正常對照組。差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。主韌帶組與骶韌帶組TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達(dá)無明顯差異,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。成纖維細(xì)胞RNA檢測結(jié)果:給藥后所有濃度TGFβ-3、COL1A1、COL3A1m RNA的表達(dá)均較空白對照組上升明顯,且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。且隨著濃度的上升,TGFβ-3、COL1A1、COL3A1m RNA的表達(dá)亦上升,濃度增加至2.5g/L時,3種因子的表達(dá)達(dá)峰值。隨著濃度的繼續(xù)升高,3種因子的表達(dá)隨之下降,但仍高于空白對照組。且補(bǔ)中益氣湯對TGFβ-3與COL1A1、COL3A1的調(diào)節(jié)作用相似。結(jié)論1.TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達(dá)在盆腔臟器脫垂患者與正常對照組子宮主骶韌帶中表達(dá)存在顯著差異,說明此三者與盆腔臟器脫垂存在密切關(guān)系,可以作為判定補(bǔ)中益氣湯對盆腔臟器脫垂患者治療是否有效的可靠指標(biāo)。2.補(bǔ)中益氣湯對盆腔臟器脫垂的治療作用可能與調(diào)節(jié)TGFβ-3、COL1A1、COL3A1 m RNA的表達(dá)有關(guān)。但其具體作用靶點和機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。3.單獨應(yīng)用補(bǔ)中益氣湯具有一定的可行性,臨床上可以通過大樣本的臨床試驗對此結(jié)論進(jìn)行考證。
【關(guān)鍵詞】:盆腔臟器脫垂 補(bǔ)中益氣湯 轉(zhuǎn)化生長因子β-3 Ⅰ型膠原蛋白 Ⅲ型膠原蛋白
【學(xué)位授予單位】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R711.2
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- Abstract7-10
- 縮略詞表10-11
- 前言11-14
- 1TGFβ-3、COL1A1、COL3A1在盆腔臟器脫垂患者子宮主骶韌帶中的表達(dá)情況14-20
- 1.1 臨床資料14-16
- 1.2 實驗研究16-20
- 2 補(bǔ)中益氣湯對子宮骶韌帶成纖維細(xì)胞TGFβ-3、COL1A1、COL3A1表達(dá)的影響20-30
- 2.1 取材20
- 2.2 儀器與試劑20-22
- 2.3 試劑及藥物制備22
- 2.4 試驗方法22-24
- 2.5 結(jié)果24-30
- 討論30-40
- 1 課題設(shè)計的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)背景30-36
- 1.1 發(fā)病因素30-31
- 1.2 膠原蛋白與POP31-34
- 1.3 TGFβ與POP34-35
- 1.4 治療35-36
- 2 課題設(shè)計的中醫(yī)理論基礎(chǔ)36-38
- 2.1 病因病機(jī)36
- 2.2 辨證施治36-37
- 2.3 補(bǔ)中益氣湯與POP37-38
- 3 本課題創(chuàng)新之處38-39
- 4 本課題相關(guān)問題及進(jìn)一步研究39-40
- 結(jié)語40-41
- 參考文獻(xiàn)41-48
- 附錄 文獻(xiàn)綜述48-60
- 參考文獻(xiàn)55-60
- 致謝60
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