子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMs)簡(jiǎn)稱內(nèi)異癥,是一種雌激素依賴性婦科疾病。近年來,子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病率呈上升趨勢(shì),已成為育齡婦女最常見的婦科疾病之一^[1]。內(nèi)異癥在組織病理學(xué)上為良性病變,但具有惡性腫瘤的生物學(xué)特征,如浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)等,少數(shù)患者可發(fā)生惡變。有研究顯示,子宮內(nèi)膜異位灶和一些相鄰的婦科腫瘤有共同的基因改變,存在惡性轉(zhuǎn)化的基因譜^[2]。RNA編輯是一種重要的轉(zhuǎn)錄后修飾方式,可以造成遺傳信息改變和蛋白質(zhì)多樣性^[3]。在人類,最普遍的RNA編輯類型是A-to-I編輯,這一過程由作用于雙鏈RNA(dsRNA)的腺苷脫氨酶家族(ADARs)催化形成^[4]。ADARs家族包括三個(gè)成員:ADAR1,ADAR2和ADAR3。ADAR1和ADAR2在組織中普遍表達(dá)且具有RNA編輯活性,而ADAR3只表達(dá)于腦組織中,無編輯活性^[5]。目前,ADAR1是研究最為明確且生物學(xué)功能尤為重要的一種腺苷脫氨酶。ADAR1介導(dǎo)的A-to-I RNA編輯的錯(cuò)誤調(diào)控與腫瘤發(fā)生有關(guān)...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖2.2ADAR1-ORF載體信息

圖2.2ADAR1-ORF載體信息圖2.2ADAR1-shRNA載體信息I數(shù)據(jù)庫(kù)中找到ADAR1序列，根據(jù)此序列設(shè)計(jì)ADAR1擴(kuò)段上設(shè)計(jì)4個(gè)shRNA靶位點(diǎn)，具體序列如下：

圖2.2ADAR1-shRNA載體信息

10圖2.2ADAR1-shRNA載體信息I數(shù)據(jù)庫(kù)中找到ADAR1序列，根據(jù)此序列設(shè)計(jì)ADAR1擴(kuò)段上設(shè)計(jì)4個(gè)shRNA靶位點(diǎn)，具體序列如下：靶位點(diǎn)序列DAR1-shRNA15’-GCCTCAAATAACATGGTAADAR1-shRNA25’-C....

圖1A.通過細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)角蛋白的表達(dá)以鑒定子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞；B.通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)水平;C.Western-blot法檢測(cè)ADAR1過表達(dá)和下調(diào)后的蛋白表

細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)熒光角蛋白的表達(dá)，對(duì)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定，其中顯示綠色熒光的部分為子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞中特有的角蛋白，最終得到的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞純度為95%左右(圖1A)。通過RT-qPCR法檢測(cè)各組中ADAR1mRNA的表達(dá)水平，應(yīng)用Westernblot法檢測(cè)ADAR....

圖2A.CCK-8法檢測(cè)子宮內(nèi)膜細(xì)胞過表達(dá)ADAR1和沉默ADAR1前后細(xì)胞的活力；B.Edu法檢測(cè)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的增殖能力

27A.CCK-8法檢測(cè)子宮內(nèi)膜細(xì)胞過表達(dá)ADAR1和沉默ADAR1前后細(xì)胞B.Edu法檢測(cè)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的增殖能力。**P<0.01,***P<0.001。R1對(duì)各組子宮內(nèi)膜細(xì)胞侵襲和遷移的影響ell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ADAR1-OE組穿過基底膜的細(xì)胞數(shù)較....

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