目的:探討Smad3在未足月胎膜早破(PPROM)胎膜中的表達情況,Smad3對羊膜上皮細胞的生物學行為的影響,及其在未足月胎膜早破發(fā)病機制中的作用。方法:收集12例PPROM孕婦(PPROM組)和15例正常足月孕婦(對照組)的胎膜組織,利用蛋白質(zhì)印跡法比較胎膜組織中的Smad3和磷酸化Smad3(p-Smad3)蛋白表達水平;免疫組織化學方法檢測p-Smad3在胎膜組織中的表達及定位;免疫熒光法檢測p-Smad3在人羊膜上皮細胞系(WISH)中的表達及定位WISH細胞分為3組:空白對照組(不經(jīng)任何處理)、陰性對照組及SIS3抑制劑組;Smad3磷酸化特異性抑制劑SIS3處理WISH細胞后,利用Edu方法和流式細胞技術(shù)分別檢測其對細胞增殖和凋亡的影響;蛋白質(zhì)印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白表達的變化。結(jié)果:①p-Smad3/Smad3在PPROM組的蛋白相對表達量(1.248±0.140)明顯低于對照組(1.579±0.199),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。②胎膜組織中p-Smad3主要表達于羊膜上皮細胞和絨毛膜滋養(yǎng)細胞,且在WISH細胞中p-Smad3主要表達于細胞核;③SIS3抑...

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【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 研究對象
    1.2 主要試劑
    1.3 實驗方法
        1.3.1 標本采集與處理
        1.3.2 細胞培養(yǎng)
        1.3.3 細胞實驗分組
        1.3.4 蛋白質(zhì)印跡法
        1.3.5 免疫組織化學法
        1.3.6 免疫熒光法
        1.3.7 Edu檢測細胞增殖
        1.3.8 流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡
        1.3.9 統(tǒng)計學分析
2 結(jié) 果
    2.1 兩組孕婦的臨床資料比較
    2.2 p-Smad3和Smad3蛋白在胎膜組織中的表達及定位
    2.3 p-Smad3在WISH細胞中的表達及定位
    2.4 p-Smad3表達降低對WISH細胞增殖的影響
    2.5 p-Smad3表達降低對WISH細胞凋亡的影響
    2.6 SIS3處理后對WISH細胞凋亡相關(guān)蛋白表達水平的影響
3 討 論
    3.1 Smad3在PPROM胎膜中的表達
    3.2 p-Smad3表達下調(diào)對WISH細胞增殖和凋亡的影響
    3.3 SIS3抑制Smad3磷酸化后誘導WISH細胞凋亡的分子機制



本文編號：3962634