目的:探討Smad3在未足月胎膜早破(PPROM)胎膜中的表達(dá)情況,Smad3對(duì)羊膜上皮細(xì)胞的生物學(xué)行為的影響,及其在未足月胎膜早破發(fā)病機(jī)制中的作用。方法:收集12例PPROM孕婦(PPROM組)和15例正常足月孕婦(對(duì)照組)的胎膜組織,利用蛋白質(zhì)印跡法比較胎膜組織中的Smad3和磷酸化Smad3(p-Smad3)蛋白表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)p-Smad3在胎膜組織中的表達(dá)及定位;免疫熒光法檢測(cè)p-Smad3在人羊膜上皮細(xì)胞系(WISH)中的表達(dá)及定位WISH細(xì)胞分為3組:空白對(duì)照組(不經(jīng)任何處理)、陰性對(duì)照組及SIS3抑制劑組;Smad3磷酸化特異性抑制劑SIS3處理WISH細(xì)胞后,利用Edu方法和流式細(xì)胞技術(shù)分別檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響;蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:①p-Smad3/Smad3在PPROM組的蛋白相對(duì)表達(dá)量(1.248±0.140)明顯低于對(duì)照組(1.579±0.199),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。②胎膜組織中p-Smad3主要表達(dá)于羊膜上皮細(xì)胞和絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞,且在WISH細(xì)胞中p-Smad3主要表達(dá)于細(xì)胞核;③SIS3抑...

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【文章目錄】：
1 資料與方法
    1.1 研究對(duì)象
    1.2 主要試劑
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 標(biāo)本采集與處理
        1.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.3.3 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組
        1.3.4 蛋白質(zhì)印跡法
        1.3.5 免疫組織化學(xué)法
        1.3.6 免疫熒光法
        1.3.7 Edu檢測(cè)細(xì)胞增殖
        1.3.8 流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 兩組孕婦的臨床資料比較
    2.2 p-Smad3和Smad3蛋白在胎膜組織中的表達(dá)及定位
    2.3 p-Smad3在WISH細(xì)胞中的表達(dá)及定位
    2.4 p-Smad3表達(dá)降低對(duì)WISH細(xì)胞增殖的影響
    2.5 p-Smad3表達(dá)降低對(duì)WISH細(xì)胞凋亡的影響
    2.6 SIS3處理后對(duì)WISH細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響
3 討 論
    3.1 Smad3在PPROM胎膜中的表達(dá)
    3.2 p-Smad3表達(dá)下調(diào)對(duì)WISH細(xì)胞增殖和凋亡的影響
    3.3 SIS3抑制Smad3磷酸化后誘導(dǎo)WISH細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制



本文編號(hào)：3962634