目的:研究經(jīng)典Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號(hào)通路參與人滋養(yǎng)細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的機(jī)制,探討其在子癇前期(preeclampsia,PE)發(fā)病中的作用。方法:(1)采用免疫組化SP法和蛋白免疫印跡法(Western blot,WB)檢測(cè)胎盤組織中β-catenin信號(hào)分子的表達(dá)。(2)將HTR8/SVneo分為正常培養(yǎng)對(duì)照組、缺氧/復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)處理組、氯化鋰(Li Cl)+H/R處理組、Li Cl+正常培養(yǎng)組。利用WB法和間接免疫熒光法檢測(cè)β-catenin在各組細(xì)胞中的表達(dá)。(3)利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡指數(shù)及細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。(4)利用Transwell小室模型和明膠酶譜法分析檢測(cè)各組HTR8/SVneo的侵襲率及基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、9的活性。結(jié)果:(1)與正常晚孕比較,子癇前期胎盤組織中β-catenin蛋白表達(dá)降低(P<0.05)。(2)與正常培養(yǎng)組相比較,H/R處理組的β-catenin蛋白水...

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圖1胎盤組織中β-catenin蛋白的表達(dá)(SP，400×)

，IOD）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以上實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。組間差異比較多組間采用單因素方差分析，如果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義則進(jìn)一步采用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行組間兩兩比較；2組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水....

圖2各組HTR8/SVneo細(xì)胞中β-catenin蛋白的表達(dá)水平β-actin42kD

捎昧蕉懶⒀?総檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。2結(jié)果2.1正常妊娠晚期及子癇前期胎盤組織中β-catenin蛋白的表達(dá)2組胎盤組織中均可見β-catenin蛋白的表達(dá)，主要定位于滋養(yǎng)細(xì)胞胞核中，胞漿亦有少量表達(dá)。與正常妊娠相比，子癇前期胎盤中β-catenin的陽性染色明顯減弱（圖1....

圖3β-catenin蛋白在HTR8/SVneo細(xì)胞中的表達(dá)定位

=0.005；P=0.006）。LiCl預(yù)處理對(duì)正常培養(yǎng)細(xì)胞的酶活性無影響（P=0.830；P=0.461）。3討論3.1經(jīng)典的Wnt/β-catenin信號(hào)通路與生殖醫(yī)學(xué)β-catenin又稱為β-連環(huán)蛋白，作為Wnt信號(hào)通路激活的標(biāo)志性分子，包含781個(gè)氨基酸，是重要的黏附因....

圖4Transwell侵襲力檢測(cè)（HE，400×）

Tab.3ApoptoticratesandROSlevelinHTR8/SVneoofeachgroup（x±s）組別凋亡率ROS熒光強(qiáng)度正常對(duì)照組H/R處理組LiCl+H/R處理組LiCl+正常培養(yǎng)組F值P值5.25±0.8114.12±2.58a9.77±2.56b6.40....

本文編號(hào)：3943172