目的:缺血再灌注損傷是引起急性腎損傷的重要原因。妊娠期急性腎損傷(Pregnancy-related acute kidney injury,Pr-AKI)是孕產(chǎn)婦嚴(yán)重的并發(fā)癥之一。在腎臟缺血再灌注損傷的過程中,炎癥反應(yīng)、腎小管上皮細(xì)胞壞死、凋亡和自噬等發(fā)揮了重要作用。我們通過查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)microRNAs(miRNAs)與腎臟缺血再灌注損傷密切相關(guān)。microRNAs是真核生物中的一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼RNA,具有參與細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、炎癥發(fā)生等生物學(xué)功能。已有研究表明miRNAs與缺血再灌注損傷密切相關(guān)。本研究主要目的是探討miR-27a通過靶向TLR4調(diào)節(jié)妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷機(jī)制。研究方法:構(gòu)建妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型,應(yīng)用基因芯片篩選腎臟缺血再灌注后差異性表達(dá)的miRNAs。應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction,PCR)檢測(cè)驗(yàn)證基因芯片篩選出的缺血再灌注損傷的腎臟組織中差異表達(dá)的miRNAs。通過生物學(xué)軟件預(yù)測(cè)miR-27a同TLR4的結(jié)合位點(diǎn),并通過雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)驗(yàn)證miR-27a可以特異性結(jié)合TLR4 mR...

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分 :妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型建立及microRNA-27a篩選及鑒定
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器及試劑
        2.2 研究方法
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注腎功能的變化
        3.2 妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注mi RNAs的芯片篩選
        3.3 RT-PCR驗(yàn)證芯片篩選差異表達(dá)的mi RNAs
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :microRNA-27a在NRK-52E細(xì)胞中對(duì)TLR4通路調(diào)控作用的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器及試劑
        2.2 研究方法
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 通過報(bào)告基因驗(yàn)證miR-27a和TLR4的結(jié)合位點(diǎn)
        3.2 miR-27a抑制NRK52E細(xì)胞中TLR4的表達(dá)
        3.3 miR-27a對(duì) NRK52E細(xì)胞增殖和凋亡功能的調(diào)節(jié)
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 :microRNA-27a通過TLR4通路調(diào)控腎臟缺血再灌注損傷的體內(nèi)研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要儀器及試劑
        2.2 研究方法
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 腎臟缺血再灌注損傷模型中miR-27a和TLR4表達(dá)的相關(guān)性
        3.2 TLR4加劇妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷
        3.3 mi R-27a可通過靶向TLR4 減輕妊娠期大鼠腎臟缺血再灌注損傷
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3887144