LAIR-1通過影響線粒體生物能量代謝抑制卵巢癌HO8910細胞生長
發(fā)布時間:2024-01-26 21:57
目的:研究人白細胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體-1(LAIR-1)對卵巢癌細胞HO8910線粒體能量代謝的影響。方法:利用低氧模擬劑CoCl2處理細胞,分析缺氧對LAIR-1表達的影響;利用LAIR-1慢病毒RNAi干擾載體(LAIR-1-RNAi-lentivirus),下調(diào)LAIR-1在卵巢癌HO8910細胞中的表達。Western blot、qRT-PCR法鑒定HO8910慢病毒感染后LAIR-1的表達水平;通過CCK-8實驗和細胞克隆形成實驗,驗證下調(diào)LAIR-1表達對HO8910細胞生長的影響;通過Seahorse生物能量分析儀,檢測下調(diào)LAIR-1表達后對HO8910細胞生物能量代謝的影響。結(jié)果:在低氧環(huán)境下,HO8910細胞的LAIR-1表達顯著上調(diào);LAIR-1-RNAi-lentivirus轉(zhuǎn)染后,HO8910細胞的LAIR-1表達顯著下調(diào),細胞生長能力明顯增強(P<0.01);LAIR-1表達顯著下調(diào)的HO8910細胞,ATP產(chǎn)生明顯改善(P<0.001),同時其基礎(chǔ)呼吸(P<0.001)和最大呼吸能力(P<0.001)均明顯提...
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 化學缺氧模型的建立
1.2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染及LAIR-1干擾細胞株構(gòu)建
1.2.3 Western blot檢測LAIR-1在HO8910細胞中的表達
1.2.4 qRT-PCR檢測LAIR-1在HO8910細胞中mRNA水平表達
1.2.5 CCK-8法檢測細胞增殖
1.2.6 克隆形成實驗
1.2.7 XF96耗氧量測定
1.3 統(tǒng)計學處理
2 結(jié) 果
2.1 缺氧環(huán)境對HO8910細胞LAIR-1表達的影響
2.2 LAIR-1干擾細胞株的構(gòu)建及鑒定
2.3 LAIR-1-RNAi慢病毒轉(zhuǎn)染后HO8910細胞生長能力的變化
2.4 LAIR-1對HO8910細胞線粒體生物能量代謝的影響
3 討 論
本文編號:3885764
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【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 化學缺氧模型的建立
1.2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染及LAIR-1干擾細胞株構(gòu)建
1.2.3 Western blot檢測LAIR-1在HO8910細胞中的表達
1.2.4 qRT-PCR檢測LAIR-1在HO8910細胞中mRNA水平表達
1.2.5 CCK-8法檢測細胞增殖
1.2.6 克隆形成實驗
1.2.7 XF96耗氧量測定
1.3 統(tǒng)計學處理
2 結(jié) 果
2.1 缺氧環(huán)境對HO8910細胞LAIR-1表達的影響
2.2 LAIR-1干擾細胞株的構(gòu)建及鑒定
2.3 LAIR-1-RNAi慢病毒轉(zhuǎn)染后HO8910細胞生長能力的變化
2.4 LAIR-1對HO8910細胞線粒體生物能量代謝的影響
3 討 論
本文編號:3885764
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