慢病毒介導(dǎo)PIK3R2基因沉默對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的影響及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2024-01-24 12:39
目的通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)探討沉默PIK3R2基因?qū)m頸癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的影響和機(jī)制。方法 qRT-PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)正常宮頸細(xì)胞Ect1/E6E7和4種宮頸癌細(xì)胞(C33A、HeLa、SiHa和CaSki)中PIK3R2的表達(dá)。將攜帶PIK3R2 shRNA的慢病毒載體轉(zhuǎn)染SiHa細(xì)胞,建立穩(wěn)定沉默PIK3R2的細(xì)胞株LV-PIK3R2-shRN,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增活力,Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移和侵襲能力,Western blot檢測(cè)增殖相關(guān)基因(CyclinD1和p21)、遷移侵襲相關(guān)基因(MMP-2和MMP-9)及PI3K/Akt信號(hào)通路重要蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt)的表達(dá)水平。結(jié)果與正常宮頸細(xì)胞Ect1/E6E7相比,4種宮頸癌細(xì)胞C33A、HeLa、SiHa、CaSki中PIK3R2 mRNA和PIK3R2蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與LV-NC組相比,LV-PIK3R2-shRNA組SiHa細(xì)胞PIK3R2蛋白的表達(dá)顯著降低,SiHa細(xì)胞在24h、48h、72h和96h時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞活力...
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本文編號(hào):3883829
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圖1Westernblot法檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞系中
圖2Westernblot法檢測(cè)宮頸癌SiHa細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白表達(dá)
圖3Westernblot法檢測(cè)宮頸癌SiHa細(xì)胞遷移
圖4Westernblot法檢測(cè)宮頸癌SiHa細(xì)胞PI3K/AKT信號(hào)
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