慢病毒介導(dǎo)PIK3R2基因沉默對宮頸癌細胞增殖、遷移及侵襲的影響及其機制研究
發(fā)布時間:2024-01-24 12:39
目的通過體外實驗探討沉默PIK3R2基因?qū)m頸癌細胞增殖、遷移及侵襲的影響和機制。方法 qRT-PCR和Western blot技術(shù)檢測正常宮頸細胞Ect1/E6E7和4種宮頸癌細胞(C33A、HeLa、SiHa和CaSki)中PIK3R2的表達。將攜帶PIK3R2 shRNA的慢病毒載體轉(zhuǎn)染SiHa細胞,建立穩(wěn)定沉默PIK3R2的細胞株LV-PIK3R2-shRN,MTT法檢測細胞增活力,Transwell實驗檢測細胞的遷移和侵襲能力,Western blot檢測增殖相關(guān)基因(CyclinD1和p21)、遷移侵襲相關(guān)基因(MMP-2和MMP-9)及PI3K/Akt信號通路重要蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt)的表達水平。結(jié)果與正常宮頸細胞Ect1/E6E7相比,4種宮頸癌細胞C33A、HeLa、SiHa、CaSki中PIK3R2 mRNA和PIK3R2蛋白相對表達量顯著升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與LV-NC組相比,LV-PIK3R2-shRNA組SiHa細胞PIK3R2蛋白的表達顯著降低,SiHa細胞在24h、48h、72h和96h時間點細胞活力...
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本文編號:3883829
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圖1Westernblot法檢測宮頸癌細胞系中
圖2Westernblot法檢測宮頸癌SiHa細胞增殖相關(guān)蛋白表達
圖3Westernblot法檢測宮頸癌SiHa細胞遷移
圖4Westernblot法檢測宮頸癌SiHa細胞PI3K/AKT信號
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