研究目的:卵巢癌的發(fā)生伴隨著各種基因通路的相互作用,研究這些基因的功能有助于癌癥的基因靶向治療。EGF、FOXM1基因均提示可能參與卵巢癌的發(fā)生與惡性進(jìn)展,本課題通過臨床標(biāo)本及體外實(shí)驗(yàn)研究EGF/FOXM1在卵巢癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移中的作用及作用機(jī)制。方法:采用免疫組化SP法對(duì)臨床上收集的卵巢癌組織標(biāo)本和正常的卵巢組織標(biāo)本檢測(cè)FOXM1的表達(dá)情況;利用Western blot技術(shù)分析人卵巢癌細(xì)胞HO8910PM、OVCAR3、SKOV3等細(xì)胞中FOXM1的表達(dá)情況;不同濃度EGF作用于SKOV3細(xì)胞后用Western blot法檢測(cè)FOXM1的表達(dá)情況;cck8法檢測(cè)不同濃度EGF對(duì)SKOV3細(xì)胞的增值影響;Transwell小室法檢測(cè)不同濃度EGF對(duì)SKOV3細(xì)胞的遷移、侵襲影響;設(shè)計(jì)合成三種靶向人FOXM1基因的si RNA表達(dá)序列,應(yīng)用脂質(zhì)體LipofectamineTM2000共轉(zhuǎn)染至SKOV3細(xì)胞作用24h后提取總蛋白,應(yīng)用Western blot技術(shù)分析轉(zhuǎn)染后SKOV3細(xì)胞FOXM1蛋白表達(dá)量,選取敲除FOXM1效能最佳的si RNA序列;cck8法檢測(cè)敲除FOXM1后添加EG...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料與方法
    2.0 材料
    2.1 方法
    2.2 細(xì)胞傳代、換液
    2.3 細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞凍存
    2.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)
    2.5 細(xì)胞形態(tài)觀察
    2.6 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
    2.7 細(xì)胞總蛋白的提取
    2.8 cck8 法檢測(cè)多濃度 EGF 干預(yù) skov3 細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)
    2.9 cck8 法檢測(cè) si RNA 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 skov3 細(xì)胞的增殖抑制實(shí)驗(yàn)
    2.10 western blotting 檢測(cè)
    2.11 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
    2.12 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)
    2.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 基因 FOXM1 的序列
    3.2 FOXM1 在卵巢癌與正常卵巢組織中表達(dá)情況
    3.3 western blotting 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)三種卵巢癌細(xì)胞株中 FOXM1 的表達(dá)量
    3.4 western blotting 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)多濃度（0,5，10,25,50,100ng/ml）EGF 對(duì) SKOV3 細(xì)胞中 FOXM1 表達(dá)的影響
    3.5 cck8 法檢測(cè)多濃度 EGF 對(duì) SKOV3 細(xì)胞的影響
    3.6 遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)濃度為 10ng/ml 的 EGF 對(duì) SKOV3 細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的作用
    3.7 侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)濃度為 10ng/ml 的 EGF 對(duì) SKOV3 細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的作用
    3.8 構(gòu)建的幾種 si RNA 的序列
    3.9 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染前后 SKOV3 細(xì)胞形態(tài)的變化
    3.10 Western blotting 分析瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后 skov3 細(xì)胞中 FOXM1 蛋白的表達(dá)
    3.11 cck8 法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后 skov3 細(xì)胞增殖的情況
    3.12 cck8 法檢測(cè)濃度為 10ng/ml 的 EGF 對(duì)轉(zhuǎn)染后的 skov3 細(xì)胞增殖的影響
第四章 討論
    4.1 本研究的實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 FOXM1 與卵巢癌
    4.3 EGF 與卵巢癌
    4.4 EGF 與 FOXM1 在 SKOV3 細(xì)胞中的作用
    4.5 總結(jié)與展望
第五章 結(jié)論
第六章 創(chuàng)新與不足
參考文獻(xiàn)
綜述：轉(zhuǎn)錄因子FOXM1 的研究現(xiàn)狀與卵巢癌的治療前景
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表論文
項(xiàng)目支持
英漢對(duì)照縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3866227