目的探討微小RNA-148a(miR-148a)靶向調(diào)控鞘氨醇-1-磷酸受體1(S1PR1)及對卵巢癌細胞增殖和凋亡的影響。方法采用實時定量PCR(QPCR)檢測32例上皮性卵巢癌組織和25例正常卵巢組織及卵巢上皮細胞IOSE80和卵巢上皮癌細胞(A2780、SKOV3、OVCAR3和HO-8910)的miR-148a水平,Kaplan-Meier plotter在線生存分析miR-148a水平與485例卵巢癌預(yù)后的關(guān)系;采用脂質(zhì)體向SKOV3細胞進行轉(zhuǎn)染,根據(jù)轉(zhuǎn)染物分為過表達組(轉(zhuǎn)染miR-148a模擬物)、陰性對照(NC)組(轉(zhuǎn)染無關(guān)序列)和對照組(未轉(zhuǎn)染),采用QPCR檢測miR-148a、S1PR1及凋亡相關(guān)因子Bcl-2、Bax和caspase-3的水平,熒光素酶報告基因系統(tǒng)驗證兩者的靶向關(guān)系,活細胞計數(shù)(CCK)-8法、AnnexinⅤ-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)和caspase-3比色分析法檢測增殖活力、凋亡率和caspase-3活性。結(jié)果 QPCR結(jié)果顯示與正常卵巢組織相比,卵巢癌組織的miR-148a水平降低(P<0.05);卵巢癌細胞的miR-148a水平均...

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 組織、細胞和主要試劑
    1.2 細胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
    1.3 總RNA提取和QPCR
    1.4 熒光素酶報告基因系統(tǒng)
    1.5 細胞增殖檢測
    1.6 細胞凋亡檢測
    1.7 caspase-3活性檢測
    1.8 預(yù)后在線分析
    1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 卵巢癌組織和細胞的miR-148a水平
    2.2 轉(zhuǎn)染mimics對SKOV3細胞miR-148a和S1PR1水平的影響
    2.3 miR-148a與S1PR1的靶向關(guān)系驗證
    2.4 過表達miR-148a對SKOV3細胞增殖的影響
    2.5 過表達miR-148a對SKOV3細胞凋亡的影響
    2.6 過表達miR-148a對SKOV3細胞caspase-3活性的影響
    2.7 過表達miR-148a對SKOV3細胞凋亡相關(guān)因子的影響
3 討 論



本文編號：3857409