宮內發(fā)育遲緩大鼠胰腺中Sox9的表達及其對胰腺發(fā)育的影響
發(fā)布時間:2023-10-06 11:34
目的:探討宮內發(fā)育遲緩大鼠在胰腺發(fā)育期Sox9的表達,及其對于胰腺細胞形成和胰腺結構的影響。研究方法:通過選取體重230-280g健康雌性、處女Wistar大鼠80只,體重300-320g健康雄性大鼠,按照雌雄(4:1)大鼠合籠,將受孕鼠隨機給予全程低蛋白飼料或正常飼料任意攝取喂養(yǎng),將其子鼠分為IUGR組和對照組(CON)組,隨機選取孕E15.5、E18.5、P1天IUGR和對照組大鼠,剖宮產或自然娩出胎鼠或新生鼠,記錄體重小于正常組體重2個標準差確定為E15.5、E18.5、P1天IUGR子鼠造模成功;在解剖顯微鏡下分離E15.5、E18.5、P1天胚胎胰腺組織;采用HE染色、透射電鏡檢測胰腺形態(tài)及超微結構;采用RT-PCR檢測Sox9、Pdx1mRNA水平;Western-blot、免疫組織化學染色檢測Sox9蛋白表達水平和位置;免疫熒光雙染檢測Sox9和Pdx1共表達情況。結果:(1)隨著胰腺的發(fā)育,腺泡、導管逐漸聚集成典型的內分泌、外分泌結構;超微結構顯示,線粒體和酶原顆粒逐漸增大;在發(fā)育階段Sox9主要聚集在胰腺的導管,且隨著胰腺發(fā)育表達量逐漸降低(P<0.01),同時...
【文章頁數】:45 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要 Abstract 英文縮略語 1 前言 2 材料與方法
2.1 材料與試劑
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗儀器
2.1.3 主要藥品及試劑
2.1.4 實驗試劑的配置
2.2 實驗方法
2.2.1 動物模型的建立
2.2.2 標本的采集及處理
2.2.3 石蠟標本制備
2.2.4 蘇木素-伊紅染色
2.2.5 組織超微結構觀察
2.2.6 免疫組織化學染色方法
2.2.7 RNA提取和RT-PCR方法
2.2.8 蛋白提取和Western-blot方法
2.2.9 免疫熒光雙染方法
2.3 統(tǒng)計學方法 3 結果
3.1 IUGR 組和 CON 組胎鼠與新生鼠體重的測量
3.2 胎鼠和新生鼠胰腺組織形態(tài)學觀察
3.3 胎鼠和新生鼠胰腺內分泌超微結構觀察
3.4 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 與 Pdx1 m RNA 表達情況
3.5 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 蛋白表達情況
3.6 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 蛋白分布情況
3.7 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 與 Pdx1 共表達情況 4 討論 5 結論 本研究創(chuàng)新性自我評價 參考文獻 綜述
參考文獻 攻讀學位期間取得的研究成果 致謝 個人簡介
本文編號:3851777
【文章頁數】:45 頁
【學位級別】:碩士
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摘要 Abstract 英文縮略語 1 前言 2 材料與方法
2.1 材料與試劑
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗儀器
2.1.3 主要藥品及試劑
2.1.4 實驗試劑的配置
2.2 實驗方法
2.2.1 動物模型的建立
2.2.2 標本的采集及處理
2.2.3 石蠟標本制備
2.2.4 蘇木素-伊紅染色
2.2.5 組織超微結構觀察
2.2.6 免疫組織化學染色方法
2.2.7 RNA提取和RT-PCR方法
2.2.8 蛋白提取和Western-blot方法
2.2.9 免疫熒光雙染方法
2.3 統(tǒng)計學方法 3 結果
3.1 IUGR 組和 CON 組胎鼠與新生鼠體重的測量
3.2 胎鼠和新生鼠胰腺組織形態(tài)學觀察
3.3 胎鼠和新生鼠胰腺內分泌超微結構觀察
3.4 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 與 Pdx1 m RNA 表達情況
3.5 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 蛋白表達情況
3.6 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 蛋白分布情況
3.7 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 與 Pdx1 共表達情況 4 討論 5 結論 本研究創(chuàng)新性自我評價 參考文獻 綜述
參考文獻 攻讀學位期間取得的研究成果 致謝 個人簡介
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