目的:探討宮內(nèi)發(fā)育遲緩大鼠在胰腺發(fā)育期Sox9的表達(dá),及其對(duì)于胰腺細(xì)胞形成和胰腺結(jié)構(gòu)的影響。研究方法:通過選取體重230-280g健康雌性、處女Wistar大鼠80只,體重300-320g健康雄性大鼠,按照雌雄(4:1)大鼠合籠,將受孕鼠隨機(jī)給予全程低蛋白飼料或正常飼料任意攝取喂養(yǎng),將其子鼠分為IUGR組和對(duì)照組(CON)組,隨機(jī)選取孕E15.5、E18.5、P1天IUGR和對(duì)照組大鼠,剖宮產(chǎn)或自然娩出胎鼠或新生鼠,記錄體重小于正常組體重2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差確定為E15.5、E18.5、P1天IUGR子鼠造模成功;在解剖顯微鏡下分離E15.5、E18.5、P1天胚胎胰腺組織;采用HE染色、透射電鏡檢測(cè)胰腺形態(tài)及超微結(jié)構(gòu);采用RT-PCR檢測(cè)Sox9、Pdx1mRNA水平;Western-blot、免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)Sox9蛋白表達(dá)水平和位置;免疫熒光雙染檢測(cè)Sox9和Pdx1共表達(dá)情況。結(jié)果:(1)隨著胰腺的發(fā)育,腺泡、導(dǎo)管逐漸聚集成典型的內(nèi)分泌、外分泌結(jié)構(gòu);超微結(jié)構(gòu)顯示,線粒體和酶原顆粒逐漸增大;在發(fā)育階段Sox9主要聚集在胰腺的導(dǎo)管,且隨著胰腺發(fā)育表達(dá)量逐漸降低(P<0.01),同時(shí)...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要 Abstract 英文縮略語 1 前言 2 材料與方法
2.1 材料與試劑
    2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.1.3 主要藥品及試劑
    2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑的配置
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2.1 動(dòng)物模型的建立
    2.2.2 標(biāo)本的采集及處理
    2.2.3 石蠟標(biāo)本制備
    2.2.4 蘇木素-伊紅染色
    2.2.5 組織超微結(jié)構(gòu)觀察
    2.2.6 免疫組織化學(xué)染色方法
    2.2.7 RNA提取和RT-PCR方法
    2.2.8 蛋白提取和Western-blot方法
    2.2.9 免疫熒光雙染方法
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 3 結(jié)果
3.1 IUGR 組和 CON 組胎鼠與新生鼠體重的測(cè)量
3.2 胎鼠和新生鼠胰腺組織形態(tài)學(xué)觀察
3.3 胎鼠和新生鼠胰腺內(nèi)分泌超微結(jié)構(gòu)觀察
3.4 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 與 Pdx1 m RNA 表達(dá)情況
3.5 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 蛋白表達(dá)情況
3.6 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 蛋白分布情況
3.7 胎鼠和新生鼠胰腺組織中 Sox9 與 Pdx1 共表達(dá)情況 4 討論 5 結(jié)論 本研究創(chuàng)新性自我評(píng)價(jià) 參考文獻(xiàn) 綜述
參考文獻(xiàn) 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果 致謝 個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3851777