IRE聯(lián)合細胞同步化對Hela細胞消融作用伴G2/M期阻滯的實驗研究
發(fā)布時間:2023-09-16 19:19
目的:探索不可逆電穿孔及脈沖電場聯(lián)合細胞周期同步化對Hela細胞的消融作用,初步了解脈沖電場引起Hela細胞G2/M期阻滯的機制。方法:實驗組為1.75 k V/cm、2.0 k V/cm、2.25 k V/cm、2.5 k V/cm,加對照組,共5組,脈沖參數(shù)為脈寬100μs,頻率1 Hz,脈沖數(shù)8個。采用洛伐他汀同步G1期,羥基脲同步S期和G2/M期,流式細胞術檢測確認。Hela細胞及同步各細胞周期的細胞進行電穿孔,6小時及12小時流式細胞術檢測細胞周期情況;24小時后流式細胞術及熒光顯微鏡檢測細胞凋亡情況;CCK-8 24小時后檢測細胞活力;CCK-8連續(xù)檢測7天測各組細胞電場處理后的增殖與活力(場強2.5k V/cm)。Hela細胞及同步各細胞周期的細胞進行場強為2.5 k V/cm的電場處理,14天吉姆薩染色觀察克隆形成情況。Western Blot檢測G2/M期細胞周期蛋白,初步了解脈沖電場引起Hela細胞G2/M期阻滯的相關機制。結(jié)果:(1)Lov作用24 h,可獲取G1期細胞(83.39±3.91)%;HU作用24 h,棄去HU,繼續(xù)培養(yǎng)3.5 h可獲取S期細胞(82....
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中英縮略詞對照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
作者簡介
本文編號:3847046
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