目的:探索不可逆電穿孔及脈沖電場(chǎng)聯(lián)合細(xì)胞周期同步化對(duì)Hela細(xì)胞的消融作用,初步了解脈沖電場(chǎng)引起Hela細(xì)胞G2/M期阻滯的機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)組為1.75 k V/cm、2.0 k V/cm、2.25 k V/cm、2.5 k V/cm,加對(duì)照組,共5組,脈沖參數(shù)為脈寬100μs,頻率1 Hz,脈沖數(shù)8個(gè)。采用洛伐他汀同步G1期,羥基脲同步S期和G2/M期,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)確認(rèn)。Hela細(xì)胞及同步各細(xì)胞周期的細(xì)胞進(jìn)行電穿孔,6小時(shí)及12小時(shí)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期情況;24小時(shí)后流式細(xì)胞術(shù)及熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況;CCK-8 24小時(shí)后檢測(cè)細(xì)胞活力;CCK-8連續(xù)檢測(cè)7天測(cè)各組細(xì)胞電場(chǎng)處理后的增殖與活力(場(chǎng)強(qiáng)2.5k V/cm)。Hela細(xì)胞及同步各細(xì)胞周期的細(xì)胞進(jìn)行場(chǎng)強(qiáng)為2.5 k V/cm的電場(chǎng)處理,14天吉姆薩染色觀察克隆形成情況。Western Blot檢測(cè)G2/M期細(xì)胞周期蛋白,初步了解脈沖電場(chǎng)引起Hela細(xì)胞G2/M期阻滯的相關(guān)機(jī)制。結(jié)果:(1)Lov作用24 h,可獲取G1期細(xì)胞(83.39±3.91)%;HU作用24 h,棄去HU,繼續(xù)培養(yǎng)3.5 h可獲取S期細(xì)胞(82....

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英縮略詞對(duì)照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3847046