SPP1蛋白在小鼠早期妊娠子宮中的表達研究
發(fā)布時間:2023-09-14 01:38
鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是一種生物活性脂質,它的水平受到合成和降解的嚴格控制。在細胞內,S1P可以被鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶(SPP)去磷酸化。SPP1通過調節(jié)神經(jīng)酰胺水平、參與神經(jīng)酰胺從內質網(wǎng)到高爾基體的運輸以及內質網(wǎng)應激誘導的自噬來調節(jié)細胞凋亡。在胚胎著床過程中,胚胎和子宮經(jīng)歷同步發(fā)展和交流,并涉及細胞凋亡過程。本研究通過建立小鼠早期妊娠模型、假孕模型、延遲著床及激活模型和人工蛻膜化模型,采用免疫組織化學技術檢測SPP1蛋白在各模型子宮組織中的表達。并用Western blot技術檢測SPP1蛋白在小鼠早期妊娠模型子宮中的表達量變化。免疫組化結果顯示SPP1蛋白在小鼠早期妊娠1-4天主要表達在腔上皮和腺上皮中。在妊娠第5天,SPP1蛋白表達在著床位點周圍的基質處。在妊娠的第6-8天,SPP1蛋白主要表達在蛻膜區(qū)。在小鼠假孕模型中,SPP1蛋白的表達模式與小鼠早期妊娠模型1-4天相似。在小鼠延遲著床模型中,SPP1蛋白主要表達在子宮的腔上皮和腺上皮中;通過雌激素處理誘導胚胎著床,SPP1蛋白主要表達在腔上皮和著床囊胚周圍的基質處。在小鼠人工蛻膜化模型中,SPP1蛋白主要表達在蛻膜區(qū),...
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1概述
1.1.1 鞘氨醇-1-磷酸和鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶
1.1.2 SPP1的發(fā)現(xiàn)
1.1.3 SPP1的生化特征及作用特點
1.1.4 SPP1的功能
1.1.5 SPP1與疾病
1.2 胚胎著床概述
1.2.1 胚胎著床中激素的調節(jié)
1.2.2 胚胎著床中細胞因子的調節(jié)
1.2.3 胚胎著床中粘附分子的調節(jié)
1.2.4 胚胎著床和細胞凋亡
1.3 本實驗研究的目的及意義
2 小鼠妊娠模型制備
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗儀器與器具
2.1.3 實驗試劑
2.1.4 實驗藥品配置
2.2 實驗方法
2.2.1 實驗前儀器處理
2.2.2 小鼠妊娠模型的建立
2.3 實驗結果與分析
2.3.1 成功建立小鼠早期妊娠模型
2.3.2 成功建立小鼠假孕模型
2.3.3 成功建立小鼠延遲著床及激活模型
2.3.4 成功建立小鼠人工蛻膜化模型
2.4 本章小結
3 免疫組織化學檢測SPP1蛋白在小鼠子宮組織中的表達
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗動物
3.1.2 實驗儀器與器具
3.1.3 實驗試劑
3.1.4 實驗藥品配置
3.2 實驗方法
3.2.1 玻片的處理
3.2.2 冰凍組織切片的制備
3.2.3 免疫組織化學操作步驟
3.3 實驗結果與分析
3.3.1 小鼠早期妊娠模型中SPP1蛋白的表達
3.3.2 小鼠假孕模型中SPP1蛋白的表達
3.3.3 小鼠延遲著床及激活模型中的SPP1蛋白表達
3.3.4 小鼠人工蛻膜化模型中SPP1蛋白的表達
3.4 本章小結
4 Western Blot檢測小鼠早期妊娠模型中SPP1蛋白的表達量變化
4.1 實驗材料
4.1.1 實驗動物
4.1.2 實驗儀器與器具
4.1.3 實驗試劑
4.1.4 實驗藥品配置
4.2 實驗方法
4.2.1 蛋白樣品的提取
4.2.2 蛋白樣品濃度測定
4.2.3 SDS-PAGE電泳
4.2.4 轉膜
4.2.5 抗原抗體雜交
4.2.6 化學發(fā)光與成像
4.3 實驗結果與分析
4.3.1 測定小鼠子宮組織蛋白濃度
4.3.2 Western Blot檢測SPP1蛋白表達量
4.4 本章小結
5 討論
結論
參考文獻
附錄
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝
本文編號:3846300
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1 緒論
1.1 鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1概述
1.1.1 鞘氨醇-1-磷酸和鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶
1.1.2 SPP1的發(fā)現(xiàn)
1.1.3 SPP1的生化特征及作用特點
1.1.4 SPP1的功能
1.1.5 SPP1與疾病
1.2 胚胎著床概述
1.2.1 胚胎著床中激素的調節(jié)
1.2.2 胚胎著床中細胞因子的調節(jié)
1.2.3 胚胎著床中粘附分子的調節(jié)
1.2.4 胚胎著床和細胞凋亡
1.3 本實驗研究的目的及意義
2 小鼠妊娠模型制備
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗儀器與器具
2.1.3 實驗試劑
2.1.4 實驗藥品配置
2.2 實驗方法
2.2.1 實驗前儀器處理
2.2.2 小鼠妊娠模型的建立
2.3 實驗結果與分析
2.3.1 成功建立小鼠早期妊娠模型
2.3.2 成功建立小鼠假孕模型
2.3.3 成功建立小鼠延遲著床及激活模型
2.3.4 成功建立小鼠人工蛻膜化模型
2.4 本章小結
3 免疫組織化學檢測SPP1蛋白在小鼠子宮組織中的表達
3.1 實驗材料
3.1.1 實驗動物
3.1.2 實驗儀器與器具
3.1.3 實驗試劑
3.1.4 實驗藥品配置
3.2 實驗方法
3.2.1 玻片的處理
3.2.2 冰凍組織切片的制備
3.2.3 免疫組織化學操作步驟
3.3 實驗結果與分析
3.3.1 小鼠早期妊娠模型中SPP1蛋白的表達
3.3.2 小鼠假孕模型中SPP1蛋白的表達
3.3.3 小鼠延遲著床及激活模型中的SPP1蛋白表達
3.3.4 小鼠人工蛻膜化模型中SPP1蛋白的表達
3.4 本章小結
4 Western Blot檢測小鼠早期妊娠模型中SPP1蛋白的表達量變化
4.1 實驗材料
4.1.1 實驗動物
4.1.2 實驗儀器與器具
4.1.3 實驗試劑
4.1.4 實驗藥品配置
4.2 實驗方法
4.2.1 蛋白樣品的提取
4.2.2 蛋白樣品濃度測定
4.2.3 SDS-PAGE電泳
4.2.4 轉膜
4.2.5 抗原抗體雜交
4.2.6 化學發(fā)光與成像
4.3 實驗結果與分析
4.3.1 測定小鼠子宮組織蛋白濃度
4.3.2 Western Blot檢測SPP1蛋白表達量
4.4 本章小結
5 討論
結論
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附錄
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