宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤之一,也是全球女性癌癥致死的主要原因之一。在早婚、生育、人乳頭瘤病毒(HPV)感染等因素作用下,宮頸癌的患病率往往較高,由于該病發(fā)展迅速,大多數(shù)女性在首次診斷時(shí)已為中晚期。臨床上宮頸癌有多種治療方法,放療為主要治療方法之一,但由于輻射抗性的存在,使患者對(duì)于放療作用敏感性下降,嚴(yán)重影響了放療患者的預(yù)后。但相關(guān)機(jī)制研究目前并未明確,因此,為增加診斷效率,提高放射治療效果,探究宮頸癌輻射敏感性相關(guān)機(jī)制尤為重要。解偶聯(lián)蛋白(uncoupling protein 2,UCP2)是一種位于線粒體內(nèi)膜上的陰離子載體蛋白,介導(dǎo)線粒體內(nèi)膜的質(zhì)子滲漏過程,從而影響細(xì)胞內(nèi)活性氧的生成,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的氧化應(yīng)激過程,進(jìn)一步通過改變線粒體自噬,細(xì)胞增殖,細(xì)胞侵襲以及細(xì)胞凋亡,腫瘤進(jìn)展以及化療耐藥等來(lái)影響腫瘤患者的預(yù)后。本研究以Hela和Caski細(xì)胞為主要研究對(duì)象,以UCP2為目標(biāo)基因,探究UCP2在輻射敏感性中的作用及線粒體相關(guān)機(jī)制。目的:以UCP2調(diào)節(jié)細(xì)胞氧化應(yīng)激為切入點(diǎn),探討UCP2在宮頸癌細(xì)胞輻射敏感性中的作用機(jī)制,為優(yōu)化宮頸癌個(gè)體治療方案,使之成為宮頸癌診斷及治療的新靶點(diǎn)提供理...

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮寫表
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 電離輻射和輻射敏感性
    1.2 宮頸癌
        1.2.1 宮頸癌現(xiàn)狀
        1.2.2 宮頸癌與放射治療
    1.3 解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)
        1.3.1 解偶聯(lián)蛋白(UCPs)結(jié)構(gòu)
        1.3.2 UCP2 與腫瘤
    1.4 線粒體
        1.4.1 線粒體結(jié)構(gòu)與功能
        1.4.2 線粒體活性氧(ROS)
        1.4.3 線粒體和電離輻射
    1.5 立題依據(jù)
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與器材
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與器材
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞來(lái)源及培養(yǎng)
        2.2.2 照射條件
        2.2.3 引物合成和質(zhì)粒構(gòu)建與擴(kuò)增
        2.2.4 細(xì)胞種板及轉(zhuǎn)染
        2.2.5 Q-PCR實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 細(xì)胞增殖存活能力檢測(cè)
        2.2.8 ROS檢測(cè)
        2.2.9 線粒體膜完整性檢測(cè)
        2.2.10 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡、周期、膜電位變化
        2.2.11 γH2AX免疫熒光染色法
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 UCP2 對(duì)電離輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞增殖存活能力影響
        3.1.1 宮頸癌細(xì)胞中UCP2 本底表達(dá)水平檢測(cè)
        3.1.2 電離輻射對(duì)于Hela細(xì)胞中UCP2 表達(dá)影響
        3.1.3 建立UCP2 沉默和過表達(dá)細(xì)胞模型
        3.1.4 UCP2 對(duì)輻照前后宮頸癌細(xì)胞的增殖存活能力的影響
    3.2 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞凋亡影響及線粒體相關(guān)機(jī)制
        3.2.1 UCP2 對(duì)于輻射誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞凋亡影響
        3.2.2 UCP2 影響輻射誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞凋亡的線粒體相關(guān)機(jī)制
        3.2.3 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞內(nèi)ROS的影響
        3.2.4 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞的線粒體膜電位的影響
        3.2.5 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞線粒體膜完整性的影響
    3.3 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞周期影響及相關(guān)機(jī)制
    3.4 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞DNA損傷修復(fù)影響及相關(guān)機(jī)制
附圖
第4章 討論
    4.1 UCP2 對(duì)輻照前后宮頸癌細(xì)胞的增殖存活能力的影響
    4.2 UCP2 與輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞凋亡關(guān)系及線粒體相關(guān)機(jī)制
    4.3 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞周期影響及相關(guān)機(jī)制
    4.4 UCP2 對(duì)輻射誘導(dǎo)的宮頸癌細(xì)胞DNA損傷修復(fù)影響及相關(guān)機(jī)制
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3835909