發(fā)布時(shí)間：2023-06-05 20:44

　　目的探討CRIM1表達(dá)與子宮頸鱗狀細(xì)胞癌微血管生成的關(guān)系及其分子機(jī)制。方法采用免疫組化MaxVision法檢測(cè)并結(jié)合光密度分析CRIM1蛋白的組織表達(dá);采用CD34內(nèi)皮標(biāo)記及Weinner計(jì)數(shù)法檢測(cè)子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中的微血管密度(microvascular density,MVD)。通過(guò)真核表達(dá)質(zhì)粒pCMV3-CRIM1轉(zhuǎn)染子宮頸鱗狀細(xì)胞癌SiHa細(xì)胞獲得CRIM1基因過(guò)表達(dá);采用Western blot法檢測(cè)癌細(xì)胞中p-ERK和VEGF的表達(dá),并利用ERK抑制處理癌細(xì)胞,觀察ERK信號(hào)抑制對(duì)VEGF表達(dá)的影響;通過(guò)ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液中VEGF蛋白含量。分別利用CCK-8實(shí)驗(yàn)和Matrigel管腔形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)的增殖和管腔形成能力。結(jié)果子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中CRIM1表達(dá)水平(200 039±163 274.86)顯著高于慢性子宮頸炎組織(28 258.0±16 606.04,P<0.001),且CRIM1表達(dá)與子宮頸鱗狀細(xì)胞癌MVD呈正相關(guān)(r=0.546,P...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 臨床資料
    1.2 方法
        1.2.1 免疫組化
        1.2.2 MVD檢測(cè)
        1.2.3 子宮頸鱗狀細(xì)胞癌SiHa細(xì)胞CRIM1基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        1.2.4 Western blot法
        1.2.5 細(xì)胞上清液中VEGF含量ELISA檢測(cè)
        1.2.6 CCK-8實(shí)驗(yàn)
        1.2.7 Matrigel膠管腔形成實(shí)驗(yàn)
        1.2.8 人重組蛋白作用SiHa
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 子宮頸鱗狀細(xì)胞癌中CRIM1的表達(dá)
    2.2 子宮頸鱗狀細(xì)胞癌中CRIM1的表達(dá)與MVD的關(guān)系
    2.3 CRIM1與SiHa細(xì)胞血管誘生能力的關(guān)系
        2.3.1 過(guò)表達(dá)CRIM1的SiHa細(xì)胞上清液促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖
        2.3.2 SiHa細(xì)胞中CRIM1過(guò)表達(dá)增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞管腔形成能力
    2.4 CRIM1活化ERK信號(hào)上調(diào)VEGF表達(dá)促進(jìn)SiHa細(xì)胞血管誘生能力
        2.4.1 CRIM1的高表達(dá)上調(diào)SiHa細(xì)胞中VEGF蛋白表達(dá)
        2.4.2 CRIM1上調(diào)VEGF表達(dá)依賴于ERK信號(hào)的活化
    2.5 外源性CRIM1對(duì)SiHa細(xì)胞中VEGF蛋白表達(dá)的影響
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本文編號(hào)：3832019