第一部分:NO濃度對囊胚發(fā)育和孵化的影響目的:研究不同濃度的NO對囊胚發(fā)育和孵化率的影響。方法:(1)將獲得的桑葚胚隨機分為5組并在各組培養(yǎng)液中添加了不同濃度(0μM、125μM、250μM、500μM、5 m M)NOS的抑制劑(L-NAME),觀察并統(tǒng)計各組囊胚發(fā)育及孵出率。(2)分別收集這5組的囊胚,用免疫熒光染色在蛋白水平上檢測eNOS的表達及強度;并添加了不同濃度(0 n M、10 n M、100 n M、500 n M和2μM)SNP繼續(xù)培養(yǎng)。收集囊胚并統(tǒng)計不同組囊胚的發(fā)育率和孵化率。(4)將獲得的桑葚胚隨機分為3組,在各組培養(yǎng)液中均添加5 m M L-NAME,另外在各組的培養(yǎng)液中添加不同濃度(10 n M、500 n M和2 u M)的SNP。結(jié)果:(1)125μM L-NAME對囊胚的發(fā)育和孵化率沒有顯著影響(P>0.05),但是隨著L-NAME濃度的繼續(xù)升高,囊胚的發(fā)育和孵化率顯著減少(P<0.05),當L-NAME的濃度達到5 m M時則完全抑制了囊胚的孵化。(2)eNOS在囊胚細胞的細胞質(zhì)中表達,隨著L-NAME的濃度提高(0μM 125μM、250...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分：NO濃度對囊胚發(fā)育和孵化的影響
    引言
    第1章 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    第2章 實驗結(jié)果
        2.1 NO的代謝水平對囊胚孵化率的影響
        2.2 抑制一氧化氮合酶對囊胚ENOS表達和孵化的影響
        2.3 L-NAME是否通過影響ENOS轉(zhuǎn)錄水平而影響蛋白表達
        2.4 NO供給劑對囊胚發(fā)育和孵化率的影響
        2.5 NO供給劑（SNP）對ENOS抑制劑L-NAME的影響
    第3章 討論
        3.1 NO在小鼠囊胚孵化的影響
        3.2 NOS抑制劑（L-NAME）對小鼠囊胚孵化的影響
        3.3 NO供給劑（SNP）對小鼠囊胚孵化的影響
        3.4 其他相關(guān)研究
    第4章 結(jié)論
    參考文獻
第二部分：NO/CGMP通路在囊胚孵化中的作用
    引言
    第1章 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    第2章 結(jié)果
        2.1 NO/CGMP通路在囊胚孵化中的作用
        2.2 NO產(chǎn)生量，囊胚孵化率及囊胚細胞數(shù)
        2.3 組織蛋白酶表達
    第3章 討論
        3.1 囊胚孵化過程
        3.2 NO/CGMP通路
        3.3 NO濃度與胚胎發(fā)育
        3.4 組織蛋白酶在囊胚孵化中的作用
        3.5 囊胚孵化相關(guān)研究
    第4章 結(jié)論
    參考文獻
第三部分：NO對囊胚細胞凋亡的影響
    引言
    第1章 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    第2章 結(jié)果
        2.1 NO對囊胚細胞凋亡熒光染色分析
        2.2 NO對囊胚細胞凋亡流式細胞儀分析
    第3章 討論
        3.1 凋亡調(diào)控
        3.2 NO/CGMP信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與細胞凋亡
        3.3 流式細胞技術(shù)和細胞凋亡的研究
        3.4 其他相關(guān)研究
    第4章 結(jié)論
    參考文獻
綜述 NO/CGMP信號通路在囊胚孵化中的作用及研究進展
    綜述參考文獻
攻讀博士學位期間的研究成果
致謝



本文編號：3815782