Wnt/β-catenin信號通路在FGR胎鼠腎臟發(fā)育不良中的作用機制研究
發(fā)布時間:2023-05-13 05:39
目的:宮內(nèi)環(huán)境不良可以造成FGR個體腎臟發(fā)育受損且成年后高血壓易感性增加,我們前期利用蛋白質(zhì)組學技術篩選發(fā)現(xiàn):新生FGR大鼠子代腎臟組織中,初級纖毛組成因子(Ift80和Ift88)明顯升高,而后者可抑制經(jīng)典Wnt信號通路。為了深入研究FGR個體成年期腎臟疾病和高血壓易感性增加的胎兒起源機制,我們對FGR胎鼠腎臟中經(jīng)典Wnt信號通路和凋亡相關因子進行研究。方法:應用孕期低蛋白法建立FGR大鼠模型,PAS染色觀察胎兒期(E20)、青年期(3W)及成年期(12W)子鼠腎組織病理變化,12W子鼠收集血清和24小時尿液檢測腎功能參數(shù)并檢測血壓。采用免疫印跡、Q-PCR、免疫組化方法對胎鼠腎臟Ift88、Wnt通路關鍵因子(Wnt7a、Wnt7b、β-catenin)和凋亡調(diào)控因子(Bcl-2家族和Caspase蛋白酶家族)進行檢測,免疫熒光雙標檢測Ift88、catenin以及凋亡因子的共定位。結果:FGR子鼠在E20、3W及12W均出現(xiàn)腎臟指數(shù)降低,腎單位減少。成年FGR子鼠腎功能參數(shù):血尿素、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶和尿蛋白均增高,并伴有血壓增高,提示腎損傷發(fā)生。E20天,FGR組腎...
【文章頁數(shù)】:47 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
2.1 研究對象與分組
2.2 主要試劑與儀器
2.2.1 主要試劑
2.2.2 主要儀器
2.3 實驗方法
2.3.1 麻醉與取材
2.3.2 生物信息學分析
2.3.3 Western Blotting
2.3.4 實時定量PCR(Q-PCR)
2.3.5 腎臟蠟塊及切片制作
2.3.6 AB-PAS染色
2.3.7 免疫組化
2.3.8 免疫熒光
2.4 統(tǒng)計分析
3 結果
3.1 一般情況和腎功能參數(shù)檢測
3.2 腎組織形態(tài)觀察
3.3 IPA因果網(wǎng)絡預測分析
3.4 Ift88和Wnt/β-catenin信號通路相關因子分析
3.5 胎鼠腎臟凋亡調(diào)控因子檢測
4 討論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷
本文編號:3815414
【文章頁數(shù)】:47 頁
【學位級別】:碩士
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摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
2.1 研究對象與分組
2.2 主要試劑與儀器
2.2.1 主要試劑
2.2.2 主要儀器
2.3 實驗方法
2.3.1 麻醉與取材
2.3.2 生物信息學分析
2.3.3 Western Blotting
2.3.4 實時定量PCR(Q-PCR)
2.3.5 腎臟蠟塊及切片制作
2.3.6 AB-PAS染色
2.3.7 免疫組化
2.3.8 免疫熒光
2.4 統(tǒng)計分析
3 結果
3.1 一般情況和腎功能參數(shù)檢測
3.2 腎組織形態(tài)觀察
3.3 IPA因果網(wǎng)絡預測分析
3.4 Ift88和Wnt/β-catenin信號通路相關因子分析
3.5 胎鼠腎臟凋亡調(diào)控因子檢測
4 討論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
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