背景:白介素17E是白介素17家族的一員,主要由免疫細(xì)胞產(chǎn)生,但是發(fā)揮著自己獨(dú)特的作用----強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)作用。順鉑作為一種廣譜抗癌藥物,被廣泛用于癌癥包括宮頸癌的臨床治療中。白介素17家族在腫瘤進(jìn)程中到底是發(fā)揮促癌作用還是抑癌作用和腫瘤的類型以及分期是息息相關(guān)的。但是白介素17E在宮頸癌中到底發(fā)揮作用與否以及具體作用,目前為止尚無文獻(xiàn)報(bào)道。大量文獻(xiàn)報(bào)道化療藥物順鉑聯(lián)合細(xì)胞因子可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡進(jìn)而促進(jìn)其死亡,因而阻止了癌癥的轉(zhuǎn)移,那么順鉑聯(lián)合白介素17E到底發(fā)揮什么樣的作用值得我們進(jìn)一步探討。目的:探討白介素17E在宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為(增殖、遷移、侵襲和凋亡)中可能發(fā)揮的作用,研究順鉑是否調(diào)控了白介素17E及其受體的表達(dá),可能發(fā)揮的作用以及可能的信號(hào)通路。方法:運(yùn)用流式細(xì)胞分析法和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)白介素17E及其受體白介素17RB在四種宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá),采用細(xì)胞增殖活力試劑盒CCK-8法分別檢測(cè)對(duì)宮頸癌細(xì)胞活力增殖的影響,同時(shí)應(yīng)用Annexin V-7AAD凋亡試劑盒檢測(cè)對(duì)細(xì)胞凋亡的作用,采用劃痕實(shí)驗(yàn)以及Transwell小室遷移,侵襲實(shí)驗(yàn)測(cè)定對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲功能的影響...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
主要中英文縮寫對(duì)照
第一章 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 宮頸癌現(xiàn)狀
        1.1.2 IL-17E簡介
        1.1.3 IL-17E與腫瘤
        1.1.4 順鉑與細(xì)胞因子
第二章 綜述
    2.1 腫瘤微環(huán)境簡介
    2.2 IL-17E與免疫細(xì)胞
        2.2.1 IL-17E與Tregs
            2.2.1.1 IL-17E/Th17細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的調(diào)控機(jī)制
        2.2.2 IL-17E與嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)
        2.2.3 IL-17E與巨噬細(xì)胞
        2.2.4 IL-17E與中性粒細(xì)胞
    2.3 IL-17E與細(xì)胞因子
    2.4 IL-17E與腫瘤
        2.4.1 IL-17E與乳腺癌
        2.4.2 IL-17家族與宮頸癌
        2.4.3 IL-17E與肺癌
    2.5 展望
    2.6 本課題研究的意義
    2.7 本課題的研究內(nèi)容
第三章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 主要實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.4 主要試劑的配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 細(xì)胞傳代
        3.2.3 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.2.4 細(xì)胞凍存
        3.2.5 細(xì)胞計(jì)數(shù)方法
        3.2.6 流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞系IL-17E/IL-17RB表達(dá)量
        3.2.7 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定細(xì)胞系IL-17E的分泌水平
        3.2.8 免疫組化檢測(cè)宮頸癌組織IL-17E/IL-17RB的表達(dá)
        3.2.9 CCK-8細(xì)胞增殖-毒性試驗(yàn)檢測(cè)藥物對(duì)宮頸細(xì)胞系HeLa/SiHa增殖的影響
        3.2.10 Transwell小室測(cè)定不同藥物對(duì)宮頸癌細(xì)胞系HeLa和SiHa侵襲能力的影響
        3.2.11 Transwell測(cè)定不同藥物對(duì)宮頸癌細(xì)胞系HeLa和SiHa遷移能力的影響
        3.2.12 劃痕實(shí)驗(yàn)間接檢測(cè)藥物對(duì)宮頸癌細(xì)胞系的增殖遷移作用
        3.2.13 AnnexinV-7AAD凋亡試劑盒檢測(cè)藥物對(duì)宮頸癌細(xì)胞系HeLa和SiHa凋亡的作用
        3.2.14 結(jié)果分析統(tǒng)計(jì)處理
第四章 結(jié)果
    4.1 IL-17E/IL-17RB在組織原位以及細(xì)胞系中的表達(dá)
        4.1.1 流式細(xì)胞分析檢測(cè)IL-17E/IL-17RB在宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)
        4.1.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定宮頸癌細(xì)胞系中分泌型IL-17E水平
        4.1.3 免疫組化檢測(cè)組織中IL-17E/IL-17RB的表達(dá)
    4.2 IL-17E對(duì)宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
        4.2.1 IL-17E促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞增殖
        4.2.2 IL-17E促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞遷移
        4.2.3 IL-17E促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞侵襲
        4.2.4 中和性IL-17E抗體促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡
    4.3 順鉑對(duì)宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
        4.3.1 順鉑抑制宮頸癌細(xì)胞增殖
        4.3.2 順鉑抑制宮頸癌細(xì)胞遷移、侵襲
        4.3.3 順鉑促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡
    4.4 順鉑下調(diào)了宮頸癌細(xì)胞中IL-17E/IL-17RB的表達(dá)
    4.5 順鉑抑制IL-17E誘導(dǎo)的刺激效應(yīng)
        4.5.1 順鉑抑制IL-17E誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖反應(yīng)
        4.5.2 順鉑抑制IL-17E誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移能力
        4.5.3 順鉑抑制IL-17E誘導(dǎo)的細(xì)胞侵襲作用
        4.5.4 順鉑誘導(dǎo)IL-17E促進(jìn)細(xì)胞凋亡
第五章 討論
第六章 結(jié)論
第七章 展望
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文
參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3814015