卵巢癌是一種常見(jiàn)的威脅女性健康的惡性腫瘤。然而卵巢癌的發(fā)生機(jī)制尚不清楚。該研究旨在探討褪黑激素受體MT1在人卵巢癌SKOV3細(xì)胞中的作用及其主要機(jī)制。采用MT1-pcDNA3.1質(zhì)粒(MT1組)與空載體pcDNA3.1(對(duì)照組)轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞,未轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞作為陰性對(duì)照組。轉(zhuǎn)染48 h后,新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h或48 h,觀察細(xì)胞周期、增殖、凋亡情況,上清液檢測(cè)褪黑激素表達(dá)。此外,在血清缺乏培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞并轉(zhuǎn)48 h后,更換新鮮培養(yǎng)基并加入4 μmol/L PF-04691502抑制劑孵化24 h。測(cè)定AKT蛋白水平、總mTOR蛋白水平和相應(yīng)磷酸化蛋白水平。結(jié)果顯示,與NC組相比,MT1組在細(xì)胞周期S期阻滯(P<0.05),伴隨增殖減少和早期凋亡(P<0.05)。3組細(xì)胞上清液檢測(cè)到褪黑激素分泌均隨時(shí)間增加(P<0.05)。Western blot分析顯示,MT1過(guò)表達(dá)抑制了PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的激活。該研究得出,SKOV3細(xì)胞有自行分泌褪黑激素的能力。MT1過(guò)表達(dá)可與內(nèi)源性褪黑激素結(jié)合,抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的激活,最終發(fā)揮抗...

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞與試劑
    1.2 MT1-pcDNA3.1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建
    1.3 Real-time定量PCR(RT-PCR)
    1.4 凋亡檢測(cè)
    1.5 細(xì)胞增殖檢測(cè)
    1.6 細(xì)胞周期檢測(cè)
    1.7 ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清液褪黑素水平
    1.8 Western blot
    1.9 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 MT1-pcDNA3.1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染進(jìn)入SKOV3細(xì)胞系
    2.2 MT1過(guò)表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞早期凋亡
    2.3 MT1過(guò)表達(dá)導(dǎo)致SKOV3細(xì)胞周期在S期發(fā)生阻滯并抑制細(xì)胞增殖
    2.4 MT1過(guò)表達(dá)抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路
    2.5 SKOV3細(xì)胞有分泌褪黑素的能力
3 討論



本文編號(hào)：3808738