背景:子宮內(nèi)膜異位癥指具有活性的子宮內(nèi)膜組織生長并附著于宮腔以外的地方。內(nèi)異癥雖然為良性的婦科疾病,但是具有一定的增殖、粘附、侵襲、轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為。內(nèi)異癥的進(jìn)展往往和盆腔內(nèi)膜細(xì)胞種植、播散、侵襲以及局部細(xì)胞因子生成和分泌相關(guān)。而透明質(zhì)酸(HA)是細(xì)胞外基質(zhì)中重要的組分,主要由透明質(zhì)酸合成酶2(HAS2)合成。在子宮內(nèi)膜癌發(fā)病機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn)HA的積累具有一定的作用,并且在其它許多癌癥中HA濃度增加與疾病的惡性進(jìn)展、生存率差有關(guān)。在乳腺癌研究中發(fā)現(xiàn)沉默HAS2可以降低HA合成從而抑制乳腺癌細(xì)胞遷移和侵襲。研究發(fā)現(xiàn)某些生長因子可以在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)HAS2,如在表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中表皮生長因子(EGF)能激活HAS2并增加細(xì)胞透明質(zhì)酸含量的表達(dá)量。文獻(xiàn)報(bào)道EGFR的表達(dá)與人內(nèi)膜周期性地生長和脫落相關(guān),且在內(nèi)異癥的研究中發(fā)現(xiàn)它與疾病的嚴(yán)重程度也存在一定的相關(guān)性。EGF與其受體(EGFR)結(jié)合后,EGFR發(fā)生磷酸化,隨后通過一系列轉(zhuǎn)錄因子傳遞信號(hào)。考慮EGF/HAS2/HA通路可能參與了內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展,然而其參與的具體分子機(jī)制仍然未知,所以值得進(jìn)一步探究。方法:臨床取新鮮的在位內(nèi)膜組織(Eu...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
英文摘要
縮略詞表
1 背景
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
    2.2 免疫熒光
    2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR (RT-qPCR)
    2.4 ELISA的具體操作步驟
    2.5 轉(zhuǎn)染siRNA建立短期表達(dá)抑制的細(xì)胞體系
    2.6 Tanswell法檢測細(xì)胞遷移
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 成功培養(yǎng)在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞,并且間質(zhì)細(xì)胞的純度在95%以上
    3.2 EGF能增加在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞(EuESCs)中HAS2的mRNA表達(dá)
    3.3 研究EGF濃度對(duì)在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞中HAS2表達(dá)的影響
    3.4 EGF能增加在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞(EuESCs)細(xì)胞外基質(zhì)中HA的表達(dá)。
    3.5 siHAS2轉(zhuǎn)染在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效率大于70%;siCtrl組中EGF能夠增加HAS2表達(dá),而siHAS2組中EGF則不能增加HAS2表達(dá)
    3.6 EGF可促進(jìn)在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞遷移,干擾HAS2的表達(dá)可以部分抑制在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞遷移
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡介



本文編號(hào)：3770556