背景/目的:侵襲、轉(zhuǎn)移是卵巢癌死亡率高的主要原因之一,然而其潛在的分子機制尚不明確。國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn),β-h CG在多種惡性腫瘤中高表達,在腫瘤發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移等進程中發(fā)揮重要的促進作用,細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)及其下游基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)等的協(xié)同作用是腫瘤細胞遷移和侵襲的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本課題旨在探索“β-h CG-ERK1/2-MMP-2”信號通路在卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移中的作用及相關(guān)分子機制。方法:培養(yǎng)卵巢癌細胞ES-2和SKOV3,應(yīng)用過表達β-hCG的慢病毒載體(LV-β-hCG)和針對β-h CG的si RNA(si RNA-β-h CG),分別轉(zhuǎn)染卵巢癌細胞,構(gòu)建過表達、敲低β-h CG表達水平的卵巢癌細胞模型,同時設(shè)置陰性對照組LV-control和si RNA-NC,q RT-PCR和Western Blot技術(shù)分析各組細胞中β-h CG的表達水平,驗證感染效率。在構(gòu)建的細胞模型基礎(chǔ)上,分別應(yīng)用細胞劃痕實驗和Transwell遷移、侵襲實驗觀察β-h CG對卵巢癌細胞體外遷移、侵襲能力的影響。q RT-PCR、Western Blot技術(shù)檢測分析過表達、敲低β-h C...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
前言
第一章 構(gòu)建過表達、敲低β-hCG的卵巢癌細胞模型
    1. 引言
    2. 實驗材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
        2.3 數(shù)據(jù)分析
    3. 結(jié)果
        3.1 載體序列與GeneBank中的β-hCG序列相符
        3.2 成功構(gòu)建穩(wěn)定過表達β-hCG的卵巢癌細胞
        3.3 成功構(gòu)建敲低β-hCG的卵巢癌細胞
    4. 討論
第二章 β-hCG調(diào)控卵巢癌細胞體外遷移侵襲的作用
    1. 引言
    2. 實驗材料與方法
        2.1 實驗材料
        2.2 實驗方法
        2.3 數(shù)據(jù)分析
    3. 結(jié)果
        3.1 細胞劃痕實驗證實β-hCG調(diào)控卵巢癌細胞體外遷移
        3.2 Transwell遷移、侵襲實驗證實β-hCG調(diào)控卵巢癌細胞體外遷移侵襲
    4. 討論
第三章“β-hCG-ERK1/2-MMP-2”調(diào)控卵巢癌細胞體外侵襲轉(zhuǎn)移的作用及其機制
    第一節(jié)“β-hCG-ERK1/2-MMP-2”調(diào)控卵巢癌細胞體外侵襲轉(zhuǎn)移的機制
        1. 引言
        2. 實驗材料與方法
            2.1 實驗材料
            2.2 實驗方法
            2.3 數(shù)據(jù)分析
        3. 結(jié)果
            3.1 過表達β-hCG的卵巢癌細胞中，β-hCG、ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2的表達水平顯著上調(diào)
            3.2 敲低β-hCG的卵巢癌細胞中，β-hCG、ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2 的表達水平顯著下調(diào)
    第二節(jié) ERK1/2“拯救”條件下，β-hCG調(diào)控卵巢癌細胞體外侵襲轉(zhuǎn)移的作用及機制
        1. 引言
        2. 實驗材料與方法
            2.1 實驗材料
            2.2 實驗方法
            2.3 數(shù)據(jù)分析
        3. 結(jié)果
            3.1 成功構(gòu)建過表達β-hCG敲低ERK1/2 的卵巢癌細胞
            3.2 Transwell遷移、侵襲實驗驗證ERK1/2“拯救”條件下，逆轉(zhuǎn)β-hCG促進卵巢癌的體外轉(zhuǎn)移能力
            3.3 ERK1/2“拯救”條件下，過表達β-hCG卵巢癌細胞中ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2的表達水平顯著下調(diào)
討論
全文總結(jié)
參考文獻
綜述 “β-hCG-ERK1/2-MMPs” 信號通路在腫瘤中的研究進展
    參考文獻
致謝信
作者簡介
石河子大學碩士研究生學位論文導(dǎo)師評閱表



本文編號：3763693