目的:探討B(tài)eclin1對宮頸癌SiHa細胞中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表達的影響。方法:用lipofectamine 2000將Beclin1基因的表達質(zhì)粒pcDNA3.1(+)-Beclin1和干擾質(zhì)粒pSUPER-Beclin1轉(zhuǎn)染SiHa細胞,設置實驗組((1):pcDNA3.1(+)-Beclin1;(2):pSUPER-Beclin1)、陰性對照組((3):pcDNA3.1(+)空載組;(4):pSUPER空載組)、空白對照組((5)組),用qRT-PCR技術檢測各組Beclin1的mRNA表達情況。在轉(zhuǎn)染成功后的48h提取各組細胞總RNA,72h提取細胞總蛋白,分別用qRT-PCR和Western blot技術檢測p-PI3K、p-AKT、p-mTOR在mRNA和蛋白水平的表達情況。結(jié)果:1.在SiHa細胞中轉(zhuǎn)染Beclin1的表達質(zhì)粒pcDNA3.1(+)-Beclin1和干擾質(zhì)粒pSUPER-Beclin1后,qRT-PCR檢測,結(jié)果顯示過表達組中的Beclin1的mRNA水平明顯增高,沉默組中的Beclin1的mRNA水平明顯降低,說明轉(zhuǎn)染成功。2....

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

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前言
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
2 結(jié)果
    2.1 qRT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后Beclin1的mRNA的變化
    2.2 過表達Beclin1后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表達情況
    2.3 沉默Beclin1后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表達情況
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
在學期間參與的科研課題與研究成果
個人簡歷



本文編號：3761760