目的探討cA MP反應元件結合蛋白(CREB)是否介導堿性成纖維細胞生長因子(b FGF)誘導的人卵巢癌CAOV3細胞Bcl-2的表達。方法分為①空白對照組,陰性對照組,siRNA CREB組。脂質體轉染干擾序列72 h,RT-PCR、Western印跡檢測CREB表達并鑒定轉染最佳濃度。②對照組,b FGF組,b FGF+siRNA組。轉染48 h后饑餓培養(yǎng)24 h。RT-PCR,Western印跡檢測Bcl-2表達。倒置顯微鏡下觀察細胞生長及形態(tài)改變,MTT法檢測細胞增殖。結果①與兩對照組相比,siRNA CREB明顯抑制CREB mRNA及蛋白表達(P<0.01),100 nmol/L抑制效果最佳。②與對照組相比,b FGF組明顯促進細胞生長,上調Bcl-2表達,b FGF+siRNA CREB組則部分抑制b FGF的作用(P<0.01)。結論 b FGF可能部分通過CREB調節(jié)人卵巢癌CAOV3細胞Bcl-2的表達,參與細胞的生存及增殖調控。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細胞轉染及分組
    1.3 RT-PCR檢測CREB、Bcl-2 mRNA表達
    1.4 Western印跡檢測CREB、Bcl-2的蛋白表達
    1.5 觀察指標
    1.6 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 siRNA CREB對CAOV3細胞CREB mRNA及蛋白表達的影響
    2.2 siRNA CREB對b FGF處理的CAOV3細胞Bcl-2 mRNA及蛋白表達的影響
    2.3 鏡下的細胞形態(tài)改變
    2.4 siRNA CREB對CAOV3細胞增殖的影響
3 討論



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