目的探討cA MP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)是否介導(dǎo)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(b FGF)誘導(dǎo)的人卵巢癌CAOV3細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)。方法分為①空白對照組,陰性對照組,siRNA CREB組。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染干擾序列72 h,RT-PCR、Western印跡檢測CREB表達(dá)并鑒定轉(zhuǎn)染最佳濃度。②對照組,b FGF組,b FGF+siRNA組。轉(zhuǎn)染48 h后饑餓培養(yǎng)24 h。RT-PCR,Western印跡檢測Bcl-2表達(dá)。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長及形態(tài)改變,MTT法檢測細(xì)胞增殖。結(jié)果①與兩對照組相比,siRNA CREB明顯抑制CREB mRNA及蛋白表達(dá)(P<0.01),100 nmol/L抑制效果最佳。②與對照組相比,b FGF組明顯促進(jìn)細(xì)胞生長,上調(diào)Bcl-2表達(dá),b FGF+siRNA CREB組則部分抑制b FGF的作用(P<0.01)。結(jié)論 b FGF可能部分通過CREB調(diào)節(jié)人卵巢癌CAOV3細(xì)胞Bcl-2的表達(dá),參與細(xì)胞的生存及增殖調(diào)控。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及分組
    1.3 RT-PCR檢測CREB、Bcl-2 mRNA表達(dá)
    1.4 Western印跡檢測CREB、Bcl-2的蛋白表達(dá)
    1.5 觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 siRNA CREB對CAOV3細(xì)胞CREB mRNA及蛋白表達(dá)的影響
    2.2 siRNA CREB對b FGF處理的CAOV3細(xì)胞Bcl-2 mRNA及蛋白表達(dá)的影響
    2.3 鏡下的細(xì)胞形態(tài)改變
    2.4 siRNA CREB對CAOV3細(xì)胞增殖的影響
3 討論



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