發(fā)布時間：2023-02-10 18:13

　　目的探究微小RNA(microRNA,miR)-195-5p通過靶向STAT3調(diào)控免疫抑制基因程序性死亡受體-配體1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)參與卵巢癌增殖和侵襲的機制。方法通過雙熒光素酶報告基因檢測方法驗證miR-195-5p靶向STAT3。將卵巢癌細胞系SKOV-3分為4組:對照組、mimic組、mimic+STAT3組和STAT3組。通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)過表達miR-195-5p和STAT3。qPCR和Western blot檢測RNA或蛋白的表達水平。分別通過CCK-8法、Transwell實驗檢測各組的細胞活力、侵襲能力。通過荷瘤裸鼠實驗在體內(nèi)驗證過表達miR-195-5p對腫瘤生長、STAT3和PD-L1的影響。結(jié)果 miR-195-5p直接靶向STAT3。過表達miR-195-5p抑制STAT3 mRNA和蛋白的表達水平(P<0.05),過表達STAT3顯著逆轉(zhuǎn)miR-195-5p對STAT3的抑制作用(P<0.05)。Mimic組的細胞活力和細胞遷移能力顯著低于對照組(P<0.05),STAT3組的細胞活力...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要材料和儀器
    1.2 miR-195-5p靶向STAT3位點預測和驗證
    1.3 細胞培養(yǎng)、分組和轉(zhuǎn)染
    1.4 qPCR檢測miR-195-5p、STAT3和PD-L1mRNA
    1.5 Western blot檢測STAT3和PD-L1蛋白
    1.6 CCK-8檢測細胞生長
    1.7 Transwell檢測細胞侵襲
    1.8 荷瘤裸鼠實驗
    1.9 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 miR-195-5p靶向STAT3
    2.2 各組miR-195-5p和STAT3表達水平比較
    2.3 各組細胞活力比較
    2.4 各組細胞侵襲能力比較
    2.5 各組PD-L1 mRNA和蛋白水平比較
    2.6 各組小鼠腫瘤體積和質(zhì)量比較
    2.7 各組miR-195-5p、STAT3和PD-L1蛋白水平比較
3 討論



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