目的:多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一種婦科常見的內(nèi)分泌疾病,也是女性不孕癥的主要原因之一,在育齡婦女中發(fā)病率約7%～9%。其臨床表現(xiàn)異質(zhì)性,不但嚴(yán)重影響患者的生殖功能,而且使雌激素依賴性腫瘤發(fā)病率增加,相關(guān)的代謝失調(diào)包括高雄激素血癥、胰島素抵抗、糖代謝異常、脂代謝異常,導(dǎo)致2型糖尿病和心血管疾病的發(fā)病率也增加。目前為止,仍不能準(zhǔn)確地說明引發(fā)PCOS的具體因素,現(xiàn)階段的研究發(fā)現(xiàn),病因主要集中在以下幾方面:遺傳因素、環(huán)境因素、高雄激素分泌、肥胖、炎癥、青春期發(fā)育亢進(jìn)等。之前有研究表明血管生成在PCOS的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,卵巢血管增生與擴(kuò)張、血流豐富是PCOS的顯著特征,PCOS的發(fā)生與血管生成相關(guān)因子的調(diào)節(jié)障礙有關(guān)。有證據(jù)表明,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)作為重要的血管生成因子參與PCOS的發(fā)生,有研究發(fā)現(xiàn)VEGF在PCOS中表達(dá)上調(diào)。Di Pietro等已證實(shí)VEGF水平可能影響PCOS大鼠卵泡發(fā)育和卵巢血管生成。VEGFA(vascular endotheli...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:MiR-185-5p對(duì) PCOS大鼠卵巢血管生成的影響
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 慢病毒過表達(dá)載體構(gòu)建
            2.2.2 動(dòng)物建模
            2.2.3 胰島素釋放評(píng)估
            2.2.4 HE染色
            2.2.5 免疫組化染色
            2.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測(cè)VEGFA
            2.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測(cè)mi R-185-5p
            2.2.8 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)VEGFA、ANGPT1、ANGPT2、PDGFB、PDGFD濃度
            2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Mi R-185-5p改善了PCOS大鼠的胰島素釋放
        3.2 Mi R-185-5p減輕PCOS大鼠卵巢形態(tài)學(xué)損傷
        3.3 Mi R-185-5p抑制PCOS大鼠卵巢中的血管生成作用
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :Mi R-185-5p通過靶向結(jié)合VEGFA影響人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HOMECs)的血管生成
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 主要試劑和儀器
            7.1.1 細(xì)胞系
            7.1.2 主要試劑
            7.1.3 主要儀器
        7.2 實(shí)驗(yàn)方法
            7.2.1 雙熒光素酶檢測(cè)
            7.2.2 人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)
            7.2.3 慢病毒感染人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞
            7.2.4 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)
            7.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測(cè)VEGFA
            7.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測(cè)mi R-185-5p
            7.2.7 MTT檢測(cè)
            7.2.8 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
            7.2.9 成管實(shí)驗(yàn)
            7.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析
    8 結(jié)果
        8.1 Mi R-185-5p直接與VEGFA相互作用
        8.2 Mi R-185-5p的過表達(dá)降低了HOMEC中的VEGFA表達(dá)
        8.3 Mi R-185 的過表達(dá)抑制HOMEC中 VEGF誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖、遷移和成管
    9 討論
    10 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3739475