目的1.通過對宮頸病變患者脫落細胞中人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染狀況檢測,分析所檢標本中高危型人乳頭瘤病毒(High-risk Human Papillomavirus,HR-HPV)的感染型別分布規(guī)律及其與臨床病理特征的關系。2.探討細胞增殖核抗原Ki67(Nuclear associated antigen Ki67,Ki67)和多腫瘤抑制基因P16蛋白(MTS1 multi pletumorsuppressor,P16)在各級宮頸病變中進行表達情況,從而為今后女性宮頸病變的預防控制及早期診斷提供科學依據(jù)。方法1.收集病理科已確診為宮頸病變患者的脫落細胞,提取細胞DNA,用β-actin引物,對所收集標本DNA進行聚合酶鏈反應(Polymerase chain reaction,PCR)擴增,檢測所提取標本DNA質量;以HPV L1區(qū)通用GP5+/6+為引物,進行PCR擴增,檢測標本中HPV總感染率,利用實時熒光PCR技術對標本進行高危型HPV的分型檢測,并對HPV感染率較高,排列于前三位的型別,用HPV E6型特異性引物進行驗證。2.對收集...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 宮頸病變中高危型HPV感染狀況分析
    1.1 材料與方法
        1.1.1 主要儀器
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 溶液配制
        1.1.4 標本及臨床資料收集
        1.1.5 引物設計
        1.1.6 標本DNA的提取
        1.1.7 提取標本DNA質量檢測
        1.1.8 標本HPV總感染率的檢測
        1.1.9 高危型人乳頭瘤病毒的15種型別檢測
        1.1.10 HPV52、HPV16、HPV58 型別檢測的結果驗證
        1.1.11 統(tǒng)計學方法
    1.2 結果
        1.2.1 液基細胞學檢測結果
        1.2.2 標本DNA質量檢測
        1.2.3 標本HPV總感染率檢測
        1.2.4 標本的15種高危型HPV的型別檢測及型別驗證
        1.2.5 HPV型別的分布特征
        1.2.6 臨床病理特征中高危型HPV感染的統(tǒng)計學分析
    1.3 討論
    1.4 小結
第2章 HR-HPV、Ki67、P16 蛋白與宮頸病變的相關性研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 標本及臨床資料收集
        2.1.5 對蠟塊進行免疫組織化學染色的程序
        2.1.6 對蠟塊進行免疫組化結果的觀察和判斷
        2.1.7 統(tǒng)計學處理
    2.2 實驗結果
        2.2.1 不同階段的宮頸病變中Ki67及P16免疫組化檢測結果
        2.2.2 不同宮頸病變中Ki67免疫組織化學染色的結果分析
        2.2.3 不同宮頸病變中Ki67表達陽性細胞在鱗狀上皮中的位置分布
        2.2.4 不同宮頸病變中P16免疫組織化學染色結果分析
        2.2.5 不同宮頸病變中HPV52、16、58的分布
        2.2.6 HPV52、16、58 的感染與Ki67和P16 表達的關系
    2.3 討論
        2.3.1 人乳頭瘤狀病毒與宮頸病變的關系
        2.3.2 Ki67與宮頸病變的相關研究
        2.3.3 P16蛋白與宮頸病變的相關研究
        2.3.4 HPV感染與Ki67和P16 表達的相關研究
    2.4 小結
參考文獻
結論
第3章 綜述
    3.1 HPV的生物學和分子生物學特性
    3.2 HPV的型別分類及相關疾病
    3.3 HPV的感染及致病機制
    3.4 HPV感染的危險因子
        3.4.1 年齡因素
        3.4.2 性別因素
        3.4.3 多重感染
        3.4.4 遺傳因素
        3.4.5 身體狀況
        3.4.6 激素水平
        3.4.7 行為危險因素
        3.4.8 其他易感因素
    3.5 宮頸癌相關診斷標志物的研究
        3.5.1 Ki67在細胞中表達的意義
        3.5.2 P16陽性表達在臨床上的應用
        3.5.3 P53在宮頸癌發(fā)生中的作用
        3.5.4 其他基因對宮頸癌發(fā)生的影響
    3.6 HPV感染的預防與治療
    參考文獻
致謝
在學期間研究成果



本文編號：3735933