背景:子宮內(nèi)膜異位癥（EMs）是一種發(fā)生于育齡婦女的雌激素依賴性婦科疾病,其致病機(jī)制尚不清楚。該病雖是良性疾病,卻具有惡性腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)。nm23-H1是一個(gè)重要的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因,且受雌激素的調(diào)節(jié)。nm23-H1在抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過程中能通過RAS-RAF-MEK-ELK1通路、或P3K-AKT-NF-κB/AP-1通路、或RAS–RAC–MKK3/6-p38通路,降低MMP-9和MMP-2的表達(dá),增強(qiáng)TIMP的表達(dá),最終減弱腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。研究表明在EMs異位內(nèi)膜中MMP-2/9（金屬基質(zhì)蛋白酶2/9）的表達(dá)有顯著性變化,為進(jìn)一步明確nm23-H1與EMs發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性及其是否通過調(diào)節(jié)MMP-2/9的表達(dá)促進(jìn)EMs發(fā)生發(fā)展,通過q RT-PCR、細(xì)胞培養(yǎng)和si RNA轉(zhuǎn)染等探索MMP-2,MMP-9基因表達(dá)跟nm23-H1及EMs的相關(guān)性及具體作用機(jī)制。通過以上實(shí)驗(yàn)研究,將基本明確nm23-H1在EMs發(fā)生中的作用,試圖明確具體作用通路,為EMs的治療提供新的靶標(biāo)。目的:探討nm23-H1和子宮內(nèi)膜異位癥之間的關(guān)系,試圖探索nm23-H1介導(dǎo)的MMP-2/MMP-9表達(dá)... 

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
研究內(nèi)容與法
    1 研究內(nèi)容
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.1 標(biāo)本采集
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)所需主要試劑
            2.1.3 實(shí)驗(yàn)耗材及儀器設(shè)備
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑配制及器械的處理
            2.2.2 組織的消化和細(xì)胞培養(yǎng)
                2.2.2.1 細(xì)胞的原代培養(yǎng)
                2.2.2.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)
                2.2.2.3 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
                2.2.2.4 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
            2.2.3 免疫細(xì)胞化學(xué)
            2.2.4 siRNA設(shè)計(jì)、片段的篩選及條件優(yōu)化
                2.2.4.1 siRNA片段設(shè)計(jì)
                2.2.4.2 siRNA轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化
                    2.2.4.2.1 陰性熒光對照轉(zhuǎn)染
                    2.2.4.2.2 GAPDH陽性對照轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化
                2.2.4.3 siRNA片段的選擇
            2.2.5 雌激素刺激下的nm23-H1、MMP-9和MMP-2的表達(dá)
            2.2.6 siRNA轉(zhuǎn)染抑制nm23-H1表達(dá)
            2.2.7 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
                2.2.7.1 細(xì)胞中總RNA的提取
                2.2.7.2 RNA濃度與純度的檢測
                2.2.7.3 qRT-PCR對目的基因的檢測
    3.統(tǒng)計(jì)方法
結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]子宮內(nèi)膜異位癥組織中MMP-2和MMP-9基因表達(dá)的意義[J]. 孔麗娜,孫青,李書勤,羅永紅,李鐵臣,盧林明.  中國病理生理雜志. 2007(02)
[2]子宮內(nèi)膜異位癥中nm23-H1基因表達(dá)的意義[J]. 李鐵臣,孔麗娜,孫青,羅永紅,盧林明.  中國病理生理雜志. 2007(01)
[3]子宮內(nèi)膜異位癥中膜型1-基質(zhì)金屬蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1表達(dá)的研究[J]. 孔麗娜,孫青,李書勤,李鐵臣,盧林明.  中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志. 2006(05)
[4]nm23-H1基因在人肺癌細(xì)胞L9981惡性表型逆轉(zhuǎn)中的作用[J]. 車國衛(wèi),周清華,王艷萍,劉倫旭,覃楊,孫芝琳,孫澤芳,陳曉禾.  生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2005(03)
[5]子宮內(nèi)膜異位癥與腫瘤轉(zhuǎn)移基因關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 孫青,孔麗娜.  國外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊. 2004(03)
[6]子宮內(nèi)膜異位癥的研究與設(shè)想[J]. 郎景和.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2003(08)

博士論文
[1]c-fos和MMP-9在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病中的作用研究[D]. 潘虹.浙江大學(xué) 2008



本文編號：3725156