目的探究CircRNA-79530與TWIST形成正反饋回路調(diào)控滋養(yǎng)細(xì)胞EMT的機(jī)制。方法篩選20例嚴(yán)重早發(fā)先兆子癇的患者和20例非嚴(yán)重早發(fā)先兆子癇的患者的胎盤樣本。重組熒光素酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TWIST與CircRNA-79530靶標(biāo)關(guān)系;RT-PCR檢測(cè)TWIST和CircRNA-79530mRNA表達(dá);Ed U染色法和CCK-8法測(cè)定細(xì)胞增殖;Annexin V-FITC檢測(cè)細(xì)胞凋亡;蛋白印跡檢測(cè)EMT蛋白表達(dá);Transwell細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移侵襲能力;蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)凋亡蛋白表達(dá)。結(jié)果重度先兆子癇組較非重度先兆子癇組TWIST、CircRNA-79530mRNA表達(dá)降低（P ＜0.05）。對(duì)照組較TWIST轉(zhuǎn)染組細(xì)胞凋亡率升高,細(xì)胞活力降低,E-鈣粘著蛋白、波形蛋白、β-連環(huán)蛋白、MMP9表達(dá)降低,細(xì)胞遷移和侵襲減少,caspase-3、Bax蛋白表達(dá)升高,Bcl-2蛋白表達(dá)降低（P ＜0.05）。結(jié)論 TWIST直接與CircRNA-79530結(jié)合形成正反饋,促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖、遷移侵襲。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 胎盤標(biāo)本采集
        1.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和質(zhì)粒構(gòu)建
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)分組
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
        1.2.2 實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)
        1.2.3 細(xì)胞增殖、活力測(cè)定
        1.2.4 細(xì)胞凋亡測(cè)定
        1.2.5 蛋白質(zhì)免疫印跡
        1.2.6 Transwell細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)
    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2結(jié)果
    2.1 重組熒光素酶檢測(cè)
    2.2 RT-PCR實(shí)時(shí)分析
    2.3細(xì)胞增殖檢測(cè)
    2.4細(xì)胞凋亡及活力檢測(cè)
    2.5 TWIST促進(jìn)細(xì)胞EMT發(fā)生
    2.6 TWIST促進(jìn)HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
    2.7 凋亡蛋白指標(biāo)檢測(cè)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]長(zhǎng)鏈非編碼RNA-TCL6在胎盤植入組織中的表達(dá)水平及對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞活性和遷移的影響[J]. 王瑞,吳淑貞,李楊,陳娟.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2019(13)



本文編號(hào)：3704583