目的探究CircRNA-79530與TWIST形成正反饋回路調控滋養(yǎng)細胞EMT的機制。方法篩選20例嚴重早發(fā)先兆子癇的患者和20例非嚴重早發(fā)先兆子癇的患者的胎盤樣本。重組熒光素酶實驗檢測TWIST與CircRNA-79530靶標關系;RT-PCR檢測TWIST和CircRNA-79530mRNA表達;Ed U染色法和CCK-8法測定細胞增殖;Annexin V-FITC檢測細胞凋亡;蛋白印跡檢測EMT蛋白表達;Transwell細胞遷移和侵襲實驗檢測細胞遷移侵襲能力;蛋白質免疫印跡法檢測凋亡蛋白表達。結果重度先兆子癇組較非重度先兆子癇組TWIST、CircRNA-79530mRNA表達降低（P ＜0.05）。對照組較TWIST轉染組細胞凋亡率升高,細胞活力降低,E-鈣粘著蛋白、波形蛋白、β-連環(huán)蛋白、MMP9表達降低,細胞遷移和侵襲減少,caspase-3、Bax蛋白表達升高,Bcl-2蛋白表達降低（P ＜0.05）。結論 TWIST直接與CircRNA-79530結合形成正反饋,促進滋養(yǎng)細胞的增殖、遷移侵襲。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 胎盤標本采集
        1.1.2 細胞培養(yǎng)和質粒構建
        1.1.3 實驗分組
    1.2 實驗方法
        1.2.1 雙熒光素酶報告基因檢測
        1.2.2 實時定量PCR(qRT-PCR)
        1.2.3 細胞增殖、活力測定
        1.2.4 細胞凋亡測定
        1.2.5 蛋白質免疫印跡
        1.2.6 Transwell細胞遷移和侵襲實驗
    1.3統(tǒng)計學方法
2結果
    2.1 重組熒光素酶檢測
    2.2 RT-PCR實時分析
    2.3細胞增殖檢測
    2.4細胞凋亡及活力檢測
    2.5 TWIST促進細胞EMT發(fā)生
    2.6 TWIST促進HTR8/SVneo細胞侵襲轉移
    2.7 凋亡蛋白指標檢測
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]長鏈非編碼RNA-TCL6在胎盤植入組織中的表達水平及對滋養(yǎng)層細胞活性和遷移的影響[J]. 王瑞,吳淑貞,李楊,陳娟.  實用醫(yī)學雜志. 2019(13)



本文編號：3704583