細(xì)菌脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）是革蘭氏陰性細(xì)菌的主要毒性成分。已有研究表明,多種妊娠不良結(jié)局常和孕期LPS暴露相關(guān),孕晚期母體LPS暴露可以導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)受限（intrauterine growth restriction,IUGR）。IUGR是指胎兒未能達(dá)到其遺傳決定的生長潛能,臨床上指出生體重低于同孕齡同性別平均出生體重第10個百分位數(shù)或兩個標(biāo)準(zhǔn)差。IUGR不僅是造成圍產(chǎn)期胎兒高發(fā)病率和死亡率的主要原因,而且也增加了多種成年期慢性疾病的發(fā)生風(fēng)險。目前,IUGR在中國以及全世界范圍內(nèi)發(fā)生率一直居高不下,但是LPS暴露是如何導(dǎo)致胎兒生長受限的機(jī)制仍不清楚。研究發(fā)現(xiàn),孕期母體糖皮質(zhì)激素（glucocorticoid,GC）的過量暴露不僅可以導(dǎo)致IUGR,而且導(dǎo)致了成年后多種慢性病的發(fā)生。在動物體內(nèi),皮質(zhì)酮是其中最重要的糖皮質(zhì)激素;而在人類中,糖皮質(zhì)激素以皮質(zhì)醇為主。GC在維持正常妊娠中發(fā)揮著重要的作用,同時對于胎兒的正常發(fā)育和分娩也是極其重要的。因此,控制胎兒循環(huán)中合適的GC水平對于營造安全的宮內(nèi)發(fā)育環(huán)境是必不可少的。Ⅱ型11β-羥基固醇脫氫酶（11β-hydr... 

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
abstract
1.前言
2.材料和方法
    2.1 主要試劑和來源
    2.2 主要藥品和試劑配制
    2.3 主要儀器
    2.4 實(shí)驗(yàn)方案
        2.4.1 LPS暴露對小鼠胎盤和人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞11β-HSD2 表達(dá)的影響
        2.4.2 PPARγ激動劑上調(diào)人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞11β-HSD2 表達(dá)
        2.4.3 LPS暴露對小鼠胎盤PPARγ及其靶基因的影響
        2.4.4 LPS暴露對人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位的影響
        2.4.5 LPS暴露對小鼠胎盤以及人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞NF-κB信號的影響
        2.4.6 LPS以 NF-κB依賴的方式抑制人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位
        2.4.7 LPS增強(qiáng)人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中NF-κB p65和PPARγ相互作用
        2.4.8 LPS介導(dǎo)的胎盤11β-HSD2 下調(diào)與胎兒生長受限的關(guān)聯(lián)的病例對照研究
    2.5 主要實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)
        2.5.1 胎盤m RNA提取與RT-PCR
        2.5.2 胎盤總蛋白的提取與蛋白濃度的測定
        2.5.3 胎盤核蛋白的提取與蛋白濃度的測定
        2.5.4 細(xì)胞胞漿蛋白和核蛋白的提取與蛋白濃度的測定
        2.5.5 蛋白免疫印跡(Western blotting)
        2.5.6 免疫組織化學(xué)檢測(Immunohistochemistry,IHC)
        2.5.7 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)
        2.5.8 小干擾RNA( Small interfering RNA,siRNA)
        2.5.9 細(xì)胞免疫熒光(Immunofluorescence,IF)
    2.6 統(tǒng)計(jì)分析
3.結(jié)果
    3.1 LPS暴露下調(diào)小鼠胎盤以及人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞11β-HSD2 表達(dá).
        3.1.1 LPS暴露下調(diào)小鼠胎盤11β-HSD2 表達(dá)
        3.1.2 LPS暴露下調(diào)人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞11β-HSD2 表達(dá)
    3.2 PPARγ激動劑上調(diào)人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞11β-HSD2 表達(dá)
        3.2.1 RSG激活人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ并上調(diào)11β-HSD2 表達(dá)
        3.2.2 PPARγ抑制劑對抗RSG上調(diào)人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞11β-HSD
    3.3 LPS暴露抑制小鼠胎盤PPARγ及其靶基因的表達(dá)
        3.3.1 孕期LPS暴露抑制小鼠胎盤PPARγ核轉(zhuǎn)位及其靶基因
        3.3.2 孕期LPS暴露抑制RSG激活小鼠胎盤PPARγ核轉(zhuǎn)位
    3.4 LPS暴露抑制人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位
        3.4.1 LPS暴露抑制人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位
        3.4.2 LPS暴露抑制RSG誘導(dǎo)人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位
    3.5 LPS暴露激活小鼠胎盤和人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞NF-κB信號
        3.5.1 孕期LPS暴露激活小鼠胎盤NF-κB信號
        3.5.2 LPS暴露激活人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞NF-κB信號
    3.6 LPS暴露通過NF-κB p65 抑制人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位
        3.6.1 阻斷NF-κBp65 減輕LPS抑制人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位
        3.6.2 沉默NF-κBp65 減弱LPS抑制人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞PPARγ核轉(zhuǎn)位和11β-HSD2 表達(dá)
    3.7 人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞NF-κB p65和PPARγ之間的相互作用
        3.7.1 人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞NF-κB p65和PPARγ在胞漿之間的相互作用
        3.7.2 人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞NF-κB p65和PPARγ在胞核之間的相互作用
        3.7.3 人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞NF-κB p65和PPARγ之間的共定位
    3.8 AGA和 SGA胎盤上11β-HSD2,PPARγ以及NF-κB p65 的水平
    3.9 新生兒體重與胎盤11β-HSD2,PPARγ以及NF-κB p65 水平之間的相關(guān)性
4.討論
5.結(jié)論
6.研究不足和下一步研究計(jì)劃
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩的病因[J]. 董彥亮.  中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志. 2002(01)



本文編號：3696641