發(fā)布時間：2022-08-12 15:55

　　熱療是與先天免疫和適應(yīng)性免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)相關(guān)的醫(yī)學(xué)手段,可以刺激穩(wěn)態(tài)趨化因子、整聯(lián)蛋白、黏附因子以及細胞因子IFN-γ、IL-2等的表達。在對宮頸癌的治療中增加熱療也會刺激細胞因子的分泌,誘導(dǎo)強烈的全身性抗HPV免疫反應(yīng),但人們目前對熱療促進細胞因子表達的機制的了解還有不足。cGAS是近年來發(fā)現(xiàn)的一種胞質(zhì)DNA識別分子,感受到胞質(zhì)中的異常DNA后會激活細胞的cGAS-STING通路,產(chǎn)生I型IFN反應(yīng),是細胞先天免疫的重要組成部分。HPV作為雙鏈DNA病毒,感染細胞后會被細胞內(nèi)及細胞間的多種免疫機制清除。相應(yīng)地,HPV也進化出多重機制逃避宿主的免疫反應(yīng),完成持續(xù)感染的病毒便是在一定程度上逃避了先天免疫反應(yīng)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)的作用。為探究熱療對cGAS表達的影響,本研究選取HPV18陽性宮頸癌細胞He La和HPV16陽性宮頸癌細胞Si Ha為研究對象,建立了加熱處理細胞的模型,用以研究宮頸癌細胞對熱療的短期應(yīng)答和循環(huán)熱處理后的細胞反應(yīng)。通過q RT-PCR檢測42℃加熱培養(yǎng)后宮頸癌細胞內(nèi)cGAS的轉(zhuǎn)錄水平,同時檢測另一核酸識別分子RIG-1的表達。結(jié)果顯示42℃培養(yǎng)60 min后cGAS的m... 

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 課題背景及研究的目的意義
    1.2 HPV的致癌機制
        1.2.1 癌蛋白E6和E7的關(guān)鍵作用
        1.2.2 免疫逃逸
        1.2.3 HPV對細胞表觀遺傳的影響
    1.3 熱療
        1.3.1 熱療的簡介
        1.3.2 熱療在腫瘤治療中的應(yīng)用
        1.3.3 熱療的作用機制
        1.3.4 熱療對宮頸癌治療的作用
    1.4 主要研究內(nèi)容
    1.5 實驗技術(shù)路線
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞系、菌株及質(zhì)粒
        2.1.2 實驗所用引物
    2.2 實驗主試劑與儀器
        2.2.1 實驗所需試劑及耗材
        2.2.2 實驗相關(guān)試劑配方
        2.2.3 主要實驗儀器及生物學(xué)分析軟件
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞培養(yǎng)
        2.3.2 RNA水平的檢測
        2.3.3 蛋白表達及純化
第3章 熱處理對cGAS表達的影響
    3.1 引言
    3.2 宮頸癌細胞熱處理模型的確立
    3.3 42℃培養(yǎng)對宮頸癌細胞cGAS和 RIG-1 轉(zhuǎn)錄水平的影響
        3.3.1 42℃培養(yǎng)對宮頸癌細胞cGAS轉(zhuǎn)錄水平的影響
        3.3.2 42℃培養(yǎng)對宮頸癌細胞RIG-1轉(zhuǎn)錄水平的影響
    3.4 42℃培養(yǎng)對C關(guān)鍵癌蛋白E6和E7 轉(zhuǎn)錄水平的影響
        3.4.1 42℃培養(yǎng)對hrHPV癌基因E6 轉(zhuǎn)錄水平的影響
        3.4.2 42℃培養(yǎng)對hrHPV癌基因E7 轉(zhuǎn)錄水平的影響
    3.5 IPTG誘導(dǎo)重組蛋白在E.coli BL21(DE3)中表達
    3.6 討論
    3.7 本章小結(jié)
第4章 熱處理對表觀遺傳修飾的調(diào)節(jié)
    4.1 引言
    4.2 42℃培養(yǎng)對宮頸癌細胞EP300轉(zhuǎn)錄水平的影響
    4.3 42℃培養(yǎng)對宮頸癌細胞GCN5轉(zhuǎn)錄水平的影響
    4.4 cGAS甲基化分析
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
結(jié)論
展望
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國宮頸癌防治任重而道遠[J]. 喬友林.  中華腫瘤雜志. 2018 (10)



本文編號：3676167