目的:研究CSPG4對上皮性卵巢癌細(xì)胞增殖與遷移的能力的影響,探討CSPG4的表達(dá)對其相關(guān)致癌信號(hào)通路的活化作用。方法:1.利用Western Blot實(shí)驗(yàn)確定CSPG4在幾種人類卵巢癌細(xì)胞系如HEY,A2780,MA-148和OVCAR-3細(xì)胞系中的蛋白表達(dá)情況。利用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)構(gòu)建CSPG4穩(wěn)定干擾及其空載體細(xì)胞系（HEY sh RNA-CSPG4及HEY sh RNA-control細(xì)胞）,使用這些配對的細(xì)胞系進(jìn)行體外功能實(shí)驗(yàn)。包括:用MTT法及軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖的能力,平板劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移的能力。明確CSPG4基因在上皮性卵巢癌細(xì)胞增殖與遷移中的重要性。2.確定CSPG4的表達(dá)對CSPG4相關(guān)致瘤信號(hào)通路的影響。相關(guān)通路標(biāo)志物為:c-Met,Akt,ERK1/2。干擾c-Met,將用于初步確定其作為CSPG4下游效應(yīng)因子的潛在重要性。結(jié)果:1.CSPG4在HEY、OVCAR-3、A2780和MA-148中的蛋白表達(dá)明顯高于Sk OV3、OVCAR-5。Western Blot結(jié)果顯示:HEY、OVCAR-3、A2780和MA-148為CSPG4的陽性表達(dá)細(xì)胞系,... 

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語表
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞系
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)器材
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 細(xì)胞的復(fù)蘇與凍存
        2.2.3 轉(zhuǎn)染
        2.2.4 免疫印跡試驗(yàn)(WesternBlot)
        2.2.5 免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence,IF)
        2.2.6 MTT法
        2.2.7 軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 統(tǒng)計(jì)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 CSPG4對上皮性卵巢癌細(xì)胞增殖和遷移的影響
        3.1.1 CSPG4在上皮性卵巢癌細(xì)胞系的表達(dá)
        3.1.2 CSPG4對上皮性卵巢癌中的細(xì)胞增殖能力的影響
        3.1.3 CSPG4對上皮性卵巢癌細(xì)胞遷移能力的影響
    3.2 CSPG4對上皮性卵巢癌c-Met和ERK1/2信號(hào)通路的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3666397