目的研究ZNF772基因啟動子區(qū)DNA甲基化的狀態(tài)與其m RNA及蛋白在宮頸癌中的表達(dá)、作用和臨床意義,并分析ZNF772啟動子區(qū)DNA甲基化水平與其表達(dá)變化的相關(guān)性。方法選取2015年9月至2018年9月于我院婦科因?qū)m頸癌及子宮良性疾病住院的女性患者共85例,臨床病歷完整,選擇正常宮頸組織45例為對照組,術(shù)后病理報告為宮頸鱗狀細(xì)胞癌（SCC）40例為SCC組,嚴(yán)格按照標(biāo)本收集的納入及排除標(biāo)準(zhǔn),所有取材經(jīng)我院病理科主任醫(yī)師明確診斷。選取3例宮頸鱗癌組織和年齡相匹配的3例正常宮頸組織作對照（Control）,采用全基因組重亞硫酸鹽測序（WGBS）聯(lián)合轉(zhuǎn)錄組測序（RNA-seq）技術(shù)篩選DNA高甲基化和低表達(dá)的轉(zhuǎn)錄子;采用實時熒光定量PCR（RT-q PCR）和亞硫酸鹽修飾后PCR（BSP）方法在40例SCC患者宮頸組織樣本和45例正常宮頸組織檢測ZNF772的m RNA的表達(dá)水平和DNA甲基化狀態(tài),免疫組織化學(xué)（SP）法檢測其蛋白表達(dá)量;在不同病理類型宮頸組織中ZNF772基因DNA甲基化狀態(tài)與m RNA的表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析;在SCC組中分析ZNF772啟動子區(qū)DNA甲基化與宮頸癌臨... 

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 實驗研究
    1.1 材料
        1.1.1 宮頸組織標(biāo)本收集
        1.1.2 實驗主要試劑
        1.1.3 實驗儀器和設(shè)備
        1.1.4 實驗試劑的配置
    1.2 實驗方法
        1.2.1 宮頸組織樣本的DNA提取
        1.2.2 宮頸組織樣本的總RNA提取
        1.2.3 宮頸組織全基因組重亞硫酸鹽測序和轉(zhuǎn)錄組測序聯(lián)合篩查分析
        1.2.4 亞硫酸鹽修飾后PCR(BSP)
        1.2.5 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)
        1.2.6 免疫組織化學(xué)染色
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
    1.4 結(jié)果
        1.4.1 各組患者一般情況分析
        1.4.2 宮頸組織中ZNF772基因啟動子區(qū)DNA甲基化的WGBS檢測.
        1.4.3 宮頸組織中RNA-seq檢測及RT-qPCR驗證
        1.4.4 BSP法檢測宮頸組織中ZNF772基因的DNA甲基化程度
        1.4.5 ZNF772基因啟動子區(qū)域生物信息學(xué)預(yù)測
        1.4.6 SP法檢測宮頸組織中ZNF772的蛋白表達(dá)
        1.4.7 ZNF772基因的DNA甲基化與其mRNA表達(dá)的相關(guān)性
        1.4.8 ZNF772基因啟動子甲基化與SCC臨床病理參數(shù)的關(guān)系
    1.5 討論
        1.5.1 宮頸組織ZNF772基因甲基化分析
        1.5.2 ZNF772基因表達(dá)下調(diào)的甲基化調(diào)控機制
        1.5.3 ZNF772基因甲基化對宮頸癌患者預(yù)后的意義
    1.6 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
第2章 綜述 ZNF基因甲基化在子宮頸癌中的研究進(jìn)展
    2.1 鋅指蛋白
        2.1.1 鋅指蛋白的結(jié)構(gòu)及功能
        2.1.2 在子宮頸癌中發(fā)揮作用鋅指蛋白
    2.2 DNA甲基化
        2.2.1 DNA甲基化概述
        2.2.2 啟動子區(qū)DNA甲基化在宮頸癌中的作用
    2.3 子宮頸癌中甲基化沉默的鋅指蛋白
        2.3.1ZNF582
        2.3.2ZNF545
        2.3.3ZNF516
    2.4 總結(jié)與展望
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]DNA及RNA甲基化檢測在腫瘤診斷中的研究進(jìn)展[J]. 趙琦,相綠竹,彭瑞,王曄,牟曉峰.  國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2019(11)
[2]鋅指蛋白267在宮頸癌中的表達(dá)水平及其對HeLa細(xì)胞增殖、凋亡、周期的影響[J]. 董紅玲.  中國婦幼保健. 2019(06)
[3]ZNF711在宮頸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J]. 蔡存?zhèn)?李曉燕,張麗娜,陳立群,張帆.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2019(01)
[4]宮頸癌靶向治療的研究進(jìn)展[J]. 王靜,劉曉軍,金志軍.  國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志. 2017(03)
[5]DNA甲基化檢測中亞硫酸氫鹽修飾方法的改進(jìn)與評價[J]. 葉松山,劉先娟,侯俊然,毛秉豫,邱耕.  中國實驗血液學(xué)雜志. 2016(02)
[6]表觀遺傳異常與宮頸癌[J]. 鄭家芬,譚超.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2015(21)
[7]廣州市2000-2011年宮頸癌發(fā)病趨勢及年齡分布特征[J]. 董航,劉華章,林國楨,李科,周琴,任澤舫.  中華疾病控制雜志. 2015(05)
[8]表觀遺傳學(xué)與宮頸癌的研究進(jìn)展[J]. 余筱,郝敏.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2015(03)
[9]ZNF217在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌中的表達(dá)及意義[J]. 郝匯平,紀(jì)新強,王曉紅.  中國婦幼健康研究. 2014 (04)
[10]4374例宮頸癌患者預(yù)后及其影響因素分析[J]. 王靜,許可葵,史百高,張克強,周萍,廖先珍,劉雙喜,張怡.  中國腫瘤. 2014(04)



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