目的:探討茯苓酸（PA）對子宮肌瘤細(xì)胞增殖、凋亡及表皮生長因子（EGF）水平的影響。方法:選取58例子宮肌瘤患者的子宮肌瘤組織進(jìn)行細(xì)胞原代培養(yǎng)。將子宮肌瘤細(xì)胞分為NC組、PA 10μg/ml組、PA 20μg/ml組、PA 40μg/ml組、PA 80μg/ml組。采用甲基噻唑基四唑（MTT）檢測各組細(xì)胞存活率,篩選PA適宜濃度進(jìn)行后續(xù)實驗。采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測PA對EGF水平的影響;蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測PA對表皮生長因子受體（EGFR）蛋白表達(dá)的影響;采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測PA對細(xì)胞中微小RNA-133a（miR-133a）表達(dá)水平的影響。miR-133a mimics及陰性對照miR-NC轉(zhuǎn)染至子宮肌瘤細(xì)胞,觀察miR-133a過表達(dá)對子宮肌瘤細(xì)胞增殖、凋亡及EGF、EGFR表達(dá)水平的影響。Western blot檢測細(xì)胞周期蛋白1（CyclinD1）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（C-caspase-3）蛋白表達(dá)。結(jié)果:與NC組比較,PA 10μg/ml組、PA 20μg/ml組、PA 40μg/ml... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 材料與試劑
        1.1.2 研究對象
        1.1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)
    1.2 方法
        1.2.1 子宮肌瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)
        1.2.2 實驗處理與分組
        1.2.3 MTT檢測細(xì)胞增殖
        1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率
        1.2.5 qRT-PCR檢測細(xì)胞中miR-133a的表達(dá)水平
        1.2.6 Western blot檢測CyclinD1、EGFR、C-caspase-3蛋白表達(dá)
        1.2.7 ELISA法檢測EGF水平
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 不同濃度PA對子宮肌瘤細(xì)胞增殖的影響
    2.2 PA對子宮肌瘤細(xì)胞凋亡和EGF的影響
    2.3 PA對miR-133a表達(dá)的影響
    2.4 高表達(dá)miR-133a對子宮肌瘤細(xì)胞增殖、凋亡及EGF的影響
    2.5 低表達(dá)miR-133a可部分逆轉(zhuǎn)PA對子宮肌瘤細(xì)胞增殖、凋亡及EGF的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3660540