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miR-182調(diào)控HIF-2α通路對低氧誘導(dǎo)子癇前期滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲的影響

發(fā)布時間:2022-02-25 06:14
  目的研究miR-182和低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF-2α)通路對低氧誘導(dǎo)人早孕期絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞(HTR8/SVneo)侵襲的影響。方法選取子癇前期(PE)孕婦67例作為研究對象,健康孕婦84例作為對照,均自愿行剖宮產(chǎn)術(shù),術(shù)后收集胎盤組織。體外培養(yǎng)HTR8/SVneo細(xì)胞,采用miR-182 inhibitor轉(zhuǎn)染處理,分為對照組、低氧組、miR-182 inhibitor組、miR-182 inhibitor陰性對照組。Western blot測定胎盤組織中HIF-2α、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)蛋白表達(dá)水平和HTR8/SVneo細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF-2α)、VEGF、E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2表達(dá)水平;實(shí)時熒光定量法(RT-qPCR)測定胎盤組織和HTR8/SVneo細(xì)胞中miR-182表達(dá)水平;流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡情況;Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)測定各組細(xì)胞侵襲能力。結(jié)果與對照組相比,PE患者胎盤組織中,HIF-2α、VEGF表達(dá)水平升高,miR-182表達(dá)水平降低(P<0.05)。與對照組相比,低氧組細(xì)... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,55(06)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 病例資源
    1.2 儀器與試劑
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染與分組
    1.4 RT-qPCR檢測胎盤中miR-182表達(dá)水平
    1.5 Western blot測定胎盤中HIF-2α、VEGF表達(dá)水平和HTR8/SVneo細(xì)胞中HIF-2α、VEGF、E-cadherin、MMP-9、MMP-2表達(dá)水平
    1.6 流式細(xì)胞儀測定HTR8/SVneo細(xì)胞凋亡率
    1.7 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)測定HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲能力
    1.8 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)檢測miR-182與HIF-2α靶標(biāo)關(guān)系
        1.8.1 熒光素酶報告實(shí)驗(yàn)突變型載體的制備
        1.8.2 熒光素酶測試報告實(shí)驗(yàn)
    1.9 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 胎盤組織中miR-182、HIF-2α、VEGF表達(dá)水平
    2.2 miR-182 inhibitor轉(zhuǎn)染處理后HTR8/SVneo細(xì)胞miR-182、HIF-2α、VEGF表達(dá)情況
    2.3 miR-182 inhibitor轉(zhuǎn)染處理后HTR8/SVneo細(xì)胞凋亡率
    2.4 HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲能力
    2.5 miR-182 inhibitor轉(zhuǎn)染處理后HTR8/SVneo細(xì)胞E-cadherin、MMP-9、MMP-2表達(dá)水平
    2.6 miR-182與HIF-2α靶標(biāo)關(guān)系
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]SHH信號通路對子癇前期患者滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡和侵襲的影響及其機(jī)制[J]. 任艷芳,姜永杰,張秀玲,姜姍,王玉紅.  吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2018(03)
[3]siRNA沉默HIF-2α基因影響人肝癌細(xì)胞株HepG2增殖與侵襲機(jī)制探討[J]. 李偉偉,耿曉松,孫建偉,張彩鳳,申保生,宋新文.  中華腫瘤防治雜志. 2018(07)
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[6]miR-182在膽囊癌中的表達(dá)及其對膽囊癌細(xì)胞增殖、侵襲能力的影響[J]. 張智勇,鄭偉,;⒘,杜立學(xué),劉陽.  陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2017(06)
[7]HIF-2α-VEGF-Notch信號通路在高強(qiáng)度聚焦超聲不完全消融后肝癌中的作用[J]. 劉航,汪偉民,張劍波,顧海濤,王繼見,周世驥.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2017(07)
[8]HIF-2α/Notch3通路介導(dǎo)CoCl2誘導(dǎo)的乳腺癌MCF-7細(xì)胞遷移和侵襲[J]. 王建國,袁磊.  生理學(xué)報. 2016(06)
[9]HIF-2α、VEGF在子癇前期患者胎盤組織中的表達(dá)及意義[J]. 郭永,付竹梅.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2015(02)



本文編號:3643853

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