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金雀異黃素調(diào)控Egr1/PTEN信號(hào)通路誘導(dǎo)卵巢癌SKOV3細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-20 04:50
  目的通過(guò)金雀異黃素(genistein)誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞SKOV3細(xì)胞的凋亡,探討即刻早期反應(yīng)基因(Egr1)/細(xì)胞骨架蛋白同源在10號(hào)染色體有缺失的磷酸酶(PTEN)信號(hào)通路在金雀異黃素誘導(dǎo)SKOV3細(xì)胞凋亡過(guò)程中的作用。方法應(yīng)用磺酰羅丹明B(SRB)染色法測(cè)定經(jīng)金雀異黃素處理后的SKOV3卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率,組蛋白DNA酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,采用游離硝基苯胺(p NA)法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)Bcl-2相關(guān)X蛋白基因(bax)和B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(bcl-2)的基因表達(dá)變化,蛋白質(zhì)印跡法(Western blotting)分析Egr1、PTEN、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果金雀異黃素顯著抑制卵巢癌細(xì)胞SKOV3的增殖(P<0.05),并呈濃度依賴性。金雀異黃素處理24 h后,處理濃度高于40μmol/L時(shí),與對(duì)照組相比,調(diào)亡指數(shù)、Caspase-3活性、bax的相對(duì)表達(dá)及細(xì)胞中Egr1蛋白和PTE... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志. 2017,18(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【文章目錄】:
材料與方法
    一、主要試劑
    二、研究方法
        1.細(xì)胞培養(yǎng)和處理
        2.SRB法測(cè)定細(xì)胞存活率:
        3.ELISA法檢測(cè)細(xì)胞凋亡:
        4.Caspase-3蛋白活性測(cè)定:
        5.RT-PCR:
        6.Western blotting分析:
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    一、金雀異黃素抑制SKOV3細(xì)胞增殖
    二、金雀異黃素對(duì)SKOV3細(xì)胞的作用
討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Inhibitory Effect of Isoflavones on Prostate Cancer Cells and PTEN Gene[J]. FENG CAO, TAI-YI JIN2, AND YUAN-FEN ZHOU Department of Occupational Health and Toxicology, School of Public Health, Fudan University, Shanghai 200032, China.  Biomedical and Environmental Sciences. 2006(01)



本文編號(hào):3634349

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