目的:探討微小RNA-216a-5p （miR-216a-5p）靶向濕疹血小板減少伴免疫缺陷綜合征樣蛋白（WASL）對子宮內(nèi)膜癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響,闡明miR-216a-5p與WASL基因的靶向關(guān)系及其作用機制。方法:收集行手術(shù)切除的47例子宮內(nèi)膜癌患者癌組織和癌旁組織;將miR-216a-5p模擬物（miR-216a-5p）、模擬物陰性對照（miR-con）、沉默對照（si-con）、沉默WASL的小干擾RNA （si-WASL）、抑制物陰性對照（anti-miR-con）、miR-216a-5p抑制物（anti-miR-216a-5p）、miR-216a-5p及空載質(zhì)粒（pcDNA）和miR-216a-5p及WASL過表達質(zhì)粒（pcDNA-WASL）分別轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜癌HEC-1-B細胞作為miR-216a-5p組、miR-con組、si-con組、si-WASL組、anti-miR-con組、anti-miR-216a-5p組、miR-216a-5p+pcDNA組和miR-216a-5p+pcDNA-WASL組。采用逆轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR （Real-time RT-qP... 

【文章來源】：吉林大學學報(醫(yī)學版). 2020,46(04)北大核心CSCD

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Western blotting法檢測子宮內(nèi)膜癌組織和癌旁組織中WASL蛋白表達電泳圖

TargetScan數(shù)據(jù)庫預測結(jié)果顯示：WASL與miR-216a-5p之間存在結(jié)合位點（圖5）。雙熒光素酶報告基因檢測結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)染野生型WASL基因表達載體WT-WASL后，與miR-con組比較，miR-216a-5p組WT-WASL載體的細胞熒光活性明顯降低（P<0.01）；而轉(zhuǎn)染突變型WASL基因表達載體MUT-WASL后，與miR-con組比較，miR-216a-5p組MUT-WASL載體的細胞熒光活性差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表3。Western blotting法檢測結(jié)果顯示：與miR-con組比較，miR-216a-5p組細胞中WASL蛋白表達水平明顯降低（P<0.05）；與anti-miR-con組比較，anti-miR-216a-5p組細胞中WASL蛋白表達水平明顯升高（P<0.05），表明miR-216a-5p可靶向調(diào)控WASL的表達。見圖6和表4。圖3 Western blotting法檢測各組細胞中WASL蛋白表達電泳圖

Western blotting法檢測各組細胞中WASL蛋白表達電泳圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]LncRNA CASC2與miR-155-5p的靶向關(guān)系及對子宮內(nèi)膜癌細胞遷移、侵襲能力的影響[J]. 馮雙苗,楊賀佳,袁銀花,張化蓮.  鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2020(02)
[2]miR-216a-5p靶向作用于PAK2對膀胱癌細胞增殖和凋亡影響的體外研究[J]. 邵煥軍,趙振伶,郝麗娜,朱家紅,孫峰.  醫(yī)學研究雜志. 2018(06)
[3]子宮內(nèi)膜癌microRNA表達譜的初步研究[J]. 周胤健,杜英,梅麗娜,鄧再興,胡慶偉,邢建明.  中華實驗和臨床病毒學雜志. 2014 (04)



本文編號：3622515