人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的顆粒細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2022-01-12 16:12
背景早發(fā)性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)是一種臨床綜合癥,表現(xiàn)為女性在40歲之前出現(xiàn)月經(jīng)過少或閉經(jīng)至少4個(gè)月,連續(xù)兩次促卵泡激素水平升高(FSH>25IU/L,兩次間隔>4周)和雌二醇(E2)水平降低,嚴(yán)重者表現(xiàn)為生育能力降低甚至不孕。目前臨床上常用的激素替代治療(hormone replacement therapy,HRT)、褪黑素、脫氫表雄酮(DHEA)、飲食和運(yùn)動(dòng)等治療手段都無法從根本上改善卵巢功能,提高患者的生育能力。因此,尋找新的治療方法來改善患者的卵巢功能,提高其生育能力是目前臨床上亟待解決的重要問題。間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)屬于成體干細(xì)胞,具有多向分化潛能和自我更新能力,全球已有大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床實(shí)驗(yàn)證明MSCs可以通過促進(jìn)卵泡生成,恢復(fù)激素水平而修復(fù)受損的卵巢功能。然而,MSCs移植面臨的致瘤性、免疫源性等問題成為其臨床應(yīng)用的阻礙。間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體(Exosomes derived from mesenchymal stem cell,MSC-EXO)...
【文章來源】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
HuMSCs細(xì)菌、
新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文20圖3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)2臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體結(jié)構(gòu)及特異性表面蛋白檢測(cè)2.1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體的形態(tài)特征
新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文21外泌體來源于胞內(nèi)體,為胞內(nèi)體內(nèi)陷形成的多泡體與細(xì)胞膜融合時(shí)釋放到細(xì)胞外的納米級(jí)微囊泡。超速離心法提取的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體,肉眼可以觀察到HuMSC-EXOs沉淀在離心管底部,呈白色絮狀物。TEM下可以觀察到,外泌體直徑在30-200nm之間,為圓形或橢圓形的膜性小囊泡,囊泡內(nèi)有低密度電子沉積物存在,其周圍可見雙層的磷脂膜結(jié)構(gòu)。如圖4所示。圖4TEM下外泌體的形態(tài)特征2.2WesternBlot檢測(cè)外泌體表面蛋白的表達(dá)外泌體表面含有多種特異性蛋白質(zhì),例如,四跨膜蛋白質(zhì)超家族成員CD81,腫瘤易感基因101(tumorsusceptibilitygene101,TSG101),分子伴侶熱休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70),膜轉(zhuǎn)運(yùn)和融合蛋白flotillin,缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白Calnexin和溶酶體相關(guān)膜蛋白LAMP1。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5所示,WesternBlot結(jié)果顯示,臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體表面特異性表達(dá)HSP70、TSG101、CD81和flotillin-1,不表達(dá)Calnexin及LAMP1,說明我們提取的HuMSC-EXOs符合外泌體表面蛋白的表達(dá)。圖5WesternBlot檢測(cè)結(jié)果1.HuMSC-EXOs2.HuMSCs
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]外泌體的提取、鑒定和保存方法研究進(jìn)展[J]. 蒲雙雙. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(05)
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)SD大鼠早衰卵巢的影響[J]. 周政,杜波,范雪,李楠,艾浩. 中國(guó)科技論文. 2018(12)
[3]外泌體分離方法研究進(jìn)展[J]. 張玉星,張響,陳文杰,張麗果. 轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)電子雜志. 2018(04)
[4]Exosomes as therapeutic drug carriers and delivery vehicles across biological membranes:current perspectives and future challenges[J]. Dinh Ha,Ningning Yang,Venkatareddy Nadithe. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2016(04)
博士論文
[1]染色體核型及轉(zhuǎn)錄因子SOHLH2、NR5A1在卵巢早衰發(fā)病機(jī)制中的作用研究[D]. 焦雪.山東大學(xué) 2014
本文編號(hào):3585075
【文章來源】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
HuMSCs細(xì)菌、
新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文20圖3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)2臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體結(jié)構(gòu)及特異性表面蛋白檢測(cè)2.1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體的形態(tài)特征
新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文21外泌體來源于胞內(nèi)體,為胞內(nèi)體內(nèi)陷形成的多泡體與細(xì)胞膜融合時(shí)釋放到細(xì)胞外的納米級(jí)微囊泡。超速離心法提取的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體,肉眼可以觀察到HuMSC-EXOs沉淀在離心管底部,呈白色絮狀物。TEM下可以觀察到,外泌體直徑在30-200nm之間,為圓形或橢圓形的膜性小囊泡,囊泡內(nèi)有低密度電子沉積物存在,其周圍可見雙層的磷脂膜結(jié)構(gòu)。如圖4所示。圖4TEM下外泌體的形態(tài)特征2.2WesternBlot檢測(cè)外泌體表面蛋白的表達(dá)外泌體表面含有多種特異性蛋白質(zhì),例如,四跨膜蛋白質(zhì)超家族成員CD81,腫瘤易感基因101(tumorsusceptibilitygene101,TSG101),分子伴侶熱休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70),膜轉(zhuǎn)運(yùn)和融合蛋白flotillin,缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白Calnexin和溶酶體相關(guān)膜蛋白LAMP1。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5所示,WesternBlot結(jié)果顯示,臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體表面特異性表達(dá)HSP70、TSG101、CD81和flotillin-1,不表達(dá)Calnexin及LAMP1,說明我們提取的HuMSC-EXOs符合外泌體表面蛋白的表達(dá)。圖5WesternBlot檢測(cè)結(jié)果1.HuMSC-EXOs2.HuMSCs
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]外泌體的提取、鑒定和保存方法研究進(jìn)展[J]. 蒲雙雙. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(05)
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)SD大鼠早衰卵巢的影響[J]. 周政,杜波,范雪,李楠,艾浩. 中國(guó)科技論文. 2018(12)
[3]外泌體分離方法研究進(jìn)展[J]. 張玉星,張響,陳文杰,張麗果. 轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)電子雜志. 2018(04)
[4]Exosomes as therapeutic drug carriers and delivery vehicles across biological membranes:current perspectives and future challenges[J]. Dinh Ha,Ningning Yang,Venkatareddy Nadithe. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2016(04)
博士論文
[1]染色體核型及轉(zhuǎn)錄因子SOHLH2、NR5A1在卵巢早衰發(fā)病機(jī)制中的作用研究[D]. 焦雪.山東大學(xué) 2014
本文編號(hào):3585075
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