研究背景及目的子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis,EMs）（以下簡稱內(nèi)異癥）是常見的婦科良性增殖性疾病,嚴(yán)重影響著女性健康。內(nèi)異癥的確切病因尚不得知,且無針對病因的有效治療,多年來始終是學(xué)者們的研究熱點(diǎn)。MicroRNAs（miRNAs）是一類非編碼RNA（noncoding RNA,ncRNA）,不參與蛋白質(zhì)的編碼,主要通過與mRNA的3’UTR（Untranslated Region）結(jié)合降解靶mRNA控制人類的蛋白編碼基因。已有大量8940microRNAs被發(fā)現(xiàn)在惡性腫瘤性疾病和內(nèi)異癥等良性疾病發(fā)生中發(fā)揮重要作用。在前期實(shí)驗(yàn)中,我們采用高通量測序的方法建立了 Ems中差異性microRNA和mRNA表達(dá)譜。測序結(jié)果顯示:與在位內(nèi)膜相比,miR-363-3p在異位病灶中顯著下調(diào);MsrB3在異位病灶中顯著上調(diào)。提示miR-363-3p可能參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病,且MsrB3是miR-363-3p生物學(xué)預(yù)測的靶基因。因此本課題選擇miR-363-3p為對象,研究其在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)、異常表達(dá)對子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞（endometrial stromal cells,En... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－ｌ．ｑＲＴ－ＰＣＲ法檢測正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜中ｍｉＲ－３６３－３ｐ的表達(dá)水平??

子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ），而上皮細(xì)胞中不表達(dá)。應(yīng)用Ｖｉｍｅｎｔｉｎ??抗體進(jìn)行熒光染色，通過染色陽性率判斷細(xì)胞純度。經(jīng)鑒定，細(xì)胞純度達(dá)９０％以上，??可用于下一步體外實(shí)驗(yàn)。（見圖２－２）??ＭＵ??圖２－２．體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞免疫熒光鑒定Ａ．細(xì)胞核染色；Ｂ．間質(zhì)細(xì)胞??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?表達(dá)陽性（Ｘ４００）??２３??

??ＨＨＩ??圖２－１．體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察Ａ．第二代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞體外??培養(yǎng)第一天（Ｘ２００）Ｂ．第二代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)第二天（Ｘ２００）??二、子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的免疫熒光鑒定??子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ），而上皮細(xì)胞中不表達(dá)。應(yīng)用Ｖｉｍｅｎｔｉｎ??抗體進(jìn)行熒光染色，通過染色陽性率判斷細(xì)胞純度。經(jīng)鑒定，細(xì)胞純度達(dá)９０％以上，??可用于下一步體外實(shí)驗(yàn)。（見圖２－２）??ＭＵ??圖２－２．體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞免疫熒光鑒定Ａ．細(xì)胞核染色；Ｂ．間質(zhì)細(xì)胞??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?表達(dá)陽性（Ｘ４００）??２３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]莖環(huán)法與加PolyA尾法PCR在檢測MicroRNA時(shí)引物設(shè)計(jì)的策略[J]. 高潤石,王紅,高艾.  毒理學(xué)雜志. 2012(05)
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[3]子宮內(nèi)膜異位癥的在位內(nèi)膜病變研究進(jìn)展[J]. 仝佳麗,郎景和.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展. 2010(06)



本文編號：3581373