研究背景及目的子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis,EMs）（以下簡稱內(nèi)異癥）是常見的婦科良性增殖性疾病,嚴重影響著女性健康。內(nèi)異癥的確切病因尚不得知,且無針對病因的有效治療,多年來始終是學者們的研究熱點。MicroRNAs（miRNAs）是一類非編碼RNA（noncoding RNA,ncRNA）,不參與蛋白質(zhì)的編碼,主要通過與mRNA的3’UTR（Untranslated Region）結(jié)合降解靶mRNA控制人類的蛋白編碼基因。已有大量8940microRNAs被發(fā)現(xiàn)在惡性腫瘤性疾病和內(nèi)異癥等良性疾病發(fā)生中發(fā)揮重要作用。在前期實驗中,我們采用高通量測序的方法建立了 Ems中差異性microRNA和mRNA表達譜。測序結(jié)果顯示:與在位內(nèi)膜相比,miR-363-3p在異位病灶中顯著下調(diào);MsrB3在異位病灶中顯著上調(diào)。提示miR-363-3p可能參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病,且MsrB3是miR-363-3p生物學預測的靶基因。因此本課題選擇miR-363-3p為對象,研究其在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達、異常表達對子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞（endometrial stromal cells,En... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學院北京市

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－ｌ．ｑＲＴ－ＰＣＲ法檢測正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜中ｍｉＲ－３６３－３ｐ的表達水平??

子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞表達波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ），而上皮細胞中不表達。應用Ｖｉｍｅｎｔｉｎ??抗體進行熒光染色，通過染色陽性率判斷細胞純度。經(jīng)鑒定，細胞純度達９０％以上，??可用于下一步體外實驗。（見圖２－２）??ＭＵ??圖２－２．體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞免疫熒光鑒定Ａ．細胞核染色；Ｂ．間質(zhì)細胞??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?表達陽性（Ｘ４００）??２３??

??ＨＨＩ??圖２－１．體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞形態(tài)學觀察Ａ．第二代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞體外??培養(yǎng)第一天（Ｘ２００）Ｂ．第二代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞體外培養(yǎng)第二天（Ｘ２００）??二、子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞的免疫熒光鑒定??子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞表達波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ），而上皮細胞中不表達。應用Ｖｉｍｅｎｔｉｎ??抗體進行熒光染色，通過染色陽性率判斷細胞純度。經(jīng)鑒定，細胞純度達９０％以上，??可用于下一步體外實驗。（見圖２－２）??ＭＵ??圖２－２．體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞免疫熒光鑒定Ａ．細胞核染色；Ｂ．間質(zhì)細胞??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?表達陽性（Ｘ４００）??２３??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]莖環(huán)法與加PolyA尾法PCR在檢測MicroRNA時引物設計的策略[J]. 高潤石,王紅,高艾.  毒理學雜志. 2012(05)
[2]Apoptosis and the target genes of microRNA-21[J]. Lindsey E.Becker Buscaglia.  癌癥. 2011(06)
[3]子宮內(nèi)膜異位癥的在位內(nèi)膜病變研究進展[J]. 仝佳麗,郎景和.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2010(06)



本文編號：3581373