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miR-139-5p通過(guò)靶向Notch1抑制上皮性卵巢癌細(xì)胞的增殖與侵襲

發(fā)布時(shí)間:2021-12-24 03:59
  目的:探討miR-139-5p靶向Notch1抑制上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)細(xì)胞增殖和侵襲的作用機(jī)制。方法:選取2018年1月至2018年12月在河南省南陽(yáng)市中心醫(yī)院婦科手術(shù)切除的24例EOC患者的癌和相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本,以及人卵巢癌細(xì)胞系SKOV3、ES2、HEY-T30和人卵巢上皮細(xì)胞株IOSE80,用qPCR檢測(cè)EOC組織和細(xì)胞系中miR-139-5p和Notch1 mRNA的表達(dá)。將過(guò)表達(dá)miR-139-5p載體、重組質(zhì)粒pLV-Notch1轉(zhuǎn)染至SKOV3細(xì)胞,并設(shè)置空白對(duì)照組(Ctrl組)和陰性對(duì)照組(NC組),用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-139-5p與Notch1 3’-UTR靶向關(guān)系,用CCK-8、Transwell、劃痕愈合實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力,用Western blotting檢測(cè)細(xì)胞中增殖和遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:與癌旁組織和IOSE80細(xì)胞比較,EOC組織和細(xì)胞系中miR-139-5p表達(dá)顯著降低、Notch1 m RNA表達(dá)顯著升高(均P<0.01)。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果證... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)腫瘤生物治療雜志. 2020,27(01)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 組織標(biāo)本、細(xì)胞系及主要試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染及分組
    1.3 q PCR檢測(cè)EOC組織和細(xì)胞系中miR-139-5p和Notch1 mRNA的表達(dá)
    1.4 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-139-5p與Notch1的靶向關(guān)系
    1.5 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SKOV3細(xì)胞的增殖能力
    1.6 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SKOV3細(xì)胞的侵襲能力
    1.7 劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SKOV3細(xì)胞的遷移能力
    1.8 Western blotting (WB) 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SKOV3細(xì)胞中增殖和遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 EOC組織和細(xì)胞系中miR-139-5p低表達(dá)而Notch1 mRNA高表達(dá)
    2.2 miR-139-5p靶向下調(diào)Notch1表達(dá)
    2.3 miR-139-5p靶向Notch1對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響
    2.4 miR-139-5p靶向Notch1對(duì)細(xì)胞侵襲能力的影響
    2.5 miR-139-5p靶向Notch1對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]敲降HE4和PAX8基因?qū)C方案治療上皮性卵巢癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響[J]. 唐海峰,李賢,劉蓓.  中國(guó)腫瘤生物治療雜志. 2019(07)
[2]上皮性卵巢癌組織中miR-21-5p、miR-29-3p、miR-139-5p表達(dá)變化及意義[J]. 崔開穎,趙素芬,朱根海.  山東醫(yī)藥. 2017(22)



本文編號(hào):3549778

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