鈣離子通道Cav1.3在子宮內膜異位癥發(fā)病中的作用機制研究
發(fā)布時間:2021-11-24 12:03
目的:子宮內膜異位癥是育齡期婦女的常見疾病,其易“轉移”與“復發(fā)”的惡性行為與惡性腫瘤相似,既往研究發(fā)現(xiàn)鈣離子通道抑制劑可抑制腫瘤細胞的增殖與遷移能力,但其是否對子宮內膜異位癥的發(fā)生與發(fā)展具有調控作用尚不明確。本文將研究:1)了解鈣離子通道Cav1.3在子宮內膜異位癥組織中的表達情況;2)了解鈣離子通道Cav1.3對子宮內膜異位癥細胞系中Ishikawa細胞生物學行為的影響。方法:用免疫組織化學的方法,對子宮內膜異位癥患者異位內膜及正常增生期內膜行免疫化學染色,比較兩組Cav1.3蛋白的表達水平;選子宮內膜異位癥細胞系中的Ishikawa細胞系,siRNA沉默Cav1.3基因,熒光顯微鏡對該細胞系的轉染效率進行初步檢測,并用Real-time PCR與Western blot的方法確定沉默效果;CCK-8實驗檢測沉默Cav1.3基因后細胞增殖能力,劃痕實驗檢測細胞體外遷徙能力,克隆形成實驗檢測細胞群體依賴性和增殖能力的改變。結果:1)Cav1.3蛋白表達于組織細胞胞膜中,在正常增生期子宮內膜組織(N)中表達陰性,在子宮內膜異位癥組織(C)中呈陽性表達,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0....
【文章來源】:蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
研究路徑
第一部分 異位癥組織鈣離子通道Cav1.3蛋白表達情況
1.1 實驗目的
1.2 實驗材料
1.3 實驗方法
1.4 實驗結果
1.5 實驗小結
第二部分 驗證siRNA靶向沉默Cav1.3基因效果
2.1 實驗目的
2.2 實驗材料
2.2.1 材料
2.2.2 儀器
2.3 實驗方法
2.3.1 細胞培養(yǎng)技術
2.3.2 質粒轉染及效率初檢
2.3.3 Real-timePCR檢測Cav1.3沉默效率
2.3.4 WesternBlot檢測Cav1.3沉默效率
2.3.5 統(tǒng)計學分析
2.4 實驗結果
2.4.1 質粒轉染效率
2.4.2 Real-timePCR
2.4.3 WesternBlot
2.5 實驗小結
第三部分 Cav1.3沉默對Ishikawa細胞生物學行為的影響
3.1 實驗目的
3.2 實驗材料
3.3 實驗方法
3.3.1 CCK-8細胞增值實驗
3.3.2 劃痕實驗
3.3.3 克隆形成實驗
3.3.4 統(tǒng)計學分析
3.4 實驗結果
3.4.1 CCK-8細胞增值實驗
3.4.2 劃痕實驗
3.4.3 克隆形成實驗
3.5 實驗小結
第四部分 實驗結果
第五部分 討論
5.1 異位內膜中L型鈣通道Cav1.3蛋白的表達
5.1.1 鈣離子通道
5.1.2 L型鈣通道Cav1.3
5.1.3 鈣離子與雌激素的非基因轉錄效應
5.1.4 內異癥病灶組織中Cav1.3蛋白的表達
5.1.5 靶向沉默Cav1.3基因對Ishikawa細胞生物學行為的影響
5.2 子宮內膜異位癥的治療新方向
5.3 局限與展望
第六部分 結論
參考文獻
英文縮略詞表
在學期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]新型鈣離子通道TRPV6在早期大腸癌中的研究意義[J]. 謝臣武,劉模榮. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2017(24)
[2]Cav1.3鈣離子通道在成年大鼠耳蝸的表達[J]. 陳金,周良強,褚漢啟,陳請國,杜智會,祁繁,劉云,孫彥博,李鵬軍,冰丹. 聽力學及言語疾病雜志. 2017(06)
[3]45歲及以上子宮內膜異位癥相關卵巢上皮性癌的風險因素分析[J]. 何政星,王姝,李戰(zhàn)飛,朱蘭,冷金花,郎景和. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2017 (05)
[4]鈣通道和細胞內鈣信號對小腸葡萄糖吸收的調節(jié)作用及機制[J]. 李玲玉,文國容,金海,徐靖宇,安家興,庹必光,董輝. 中國糖尿病雜志. 2017(05)
[5]子宮內膜異位癥的治療進展[J]. 邱銳. 中外女性健康研究. 2017(05)
[6]慢性腦缺血對大鼠海馬鈣通道Cav1.3表達的影響[J]. 郭森,朱江. 承德醫(yī)學院學報. 2017(01)
[7]腹腔鏡卵巢巧克力囊腫剝除術后卵巢儲備功能及妊娠率的研究[J]. 蘇悅,馬志松. 陜西醫(yī)學雜志. 2016(12)
[8]腦缺血對大鼠大腦皮質中鈣通道Cav1.3表達的影響[J]. 郭森,朱江,王永為,楊松鶴,孔祥玉. 解剖學雜志. 2016 (03)
[9]Nav 1.7與L-型鈣離子通道在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 李慧,王路芳,吳愛娣,季鑫,武昕. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2016(13)
[10]通過環(huán)磷酸腺苷信號通路治療焦慮癥的研究進展[J]. 朱春輝. 中國藥房. 2015(28)
博士論文
[1]AC/cAMP-PKA介導的磷酸化對小鼠胚胎心肌細胞上的基礎L-型鈣離子通道的調控作用[D]. 嚴喜勝.華中科技大學 2011
碩士論文
[1]腹腔鏡卵巢子宮內膜異位囊腫剔除術對卵巢儲備功能影響的研究[D]. 郭舟群.石河子大學 2016
[2]黃連素通過cAMP-PKA-鈣離子通道促進胰島素分泌的初步研究[D]. 張敏.天津醫(yī)科大學 2016
[3]心肌Cav1.3鈣離子通道與snapin蛋白相互作用的鑒定及其功能初探[D]. 翟溯瀾.鄭州大學 2008
本文編號:3515939
【文章來源】:蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
研究路徑
第一部分 異位癥組織鈣離子通道Cav1.3蛋白表達情況
1.1 實驗目的
1.2 實驗材料
1.3 實驗方法
1.4 實驗結果
1.5 實驗小結
第二部分 驗證siRNA靶向沉默Cav1.3基因效果
2.1 實驗目的
2.2 實驗材料
2.2.1 材料
2.2.2 儀器
2.3 實驗方法
2.3.1 細胞培養(yǎng)技術
2.3.2 質粒轉染及效率初檢
2.3.3 Real-timePCR檢測Cav1.3沉默效率
2.3.4 WesternBlot檢測Cav1.3沉默效率
2.3.5 統(tǒng)計學分析
2.4 實驗結果
2.4.1 質粒轉染效率
2.4.2 Real-timePCR
2.4.3 WesternBlot
2.5 實驗小結
第三部分 Cav1.3沉默對Ishikawa細胞生物學行為的影響
3.1 實驗目的
3.2 實驗材料
3.3 實驗方法
3.3.1 CCK-8細胞增值實驗
3.3.2 劃痕實驗
3.3.3 克隆形成實驗
3.3.4 統(tǒng)計學分析
3.4 實驗結果
3.4.1 CCK-8細胞增值實驗
3.4.2 劃痕實驗
3.4.3 克隆形成實驗
3.5 實驗小結
第四部分 實驗結果
第五部分 討論
5.1 異位內膜中L型鈣通道Cav1.3蛋白的表達
5.1.1 鈣離子通道
5.1.2 L型鈣通道Cav1.3
5.1.3 鈣離子與雌激素的非基因轉錄效應
5.1.4 內異癥病灶組織中Cav1.3蛋白的表達
5.1.5 靶向沉默Cav1.3基因對Ishikawa細胞生物學行為的影響
5.2 子宮內膜異位癥的治療新方向
5.3 局限與展望
第六部分 結論
參考文獻
英文縮略詞表
在學期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]新型鈣離子通道TRPV6在早期大腸癌中的研究意義[J]. 謝臣武,劉模榮. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2017(24)
[2]Cav1.3鈣離子通道在成年大鼠耳蝸的表達[J]. 陳金,周良強,褚漢啟,陳請國,杜智會,祁繁,劉云,孫彥博,李鵬軍,冰丹. 聽力學及言語疾病雜志. 2017(06)
[3]45歲及以上子宮內膜異位癥相關卵巢上皮性癌的風險因素分析[J]. 何政星,王姝,李戰(zhàn)飛,朱蘭,冷金花,郎景和. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2017 (05)
[4]鈣通道和細胞內鈣信號對小腸葡萄糖吸收的調節(jié)作用及機制[J]. 李玲玉,文國容,金海,徐靖宇,安家興,庹必光,董輝. 中國糖尿病雜志. 2017(05)
[5]子宮內膜異位癥的治療進展[J]. 邱銳. 中外女性健康研究. 2017(05)
[6]慢性腦缺血對大鼠海馬鈣通道Cav1.3表達的影響[J]. 郭森,朱江. 承德醫(yī)學院學報. 2017(01)
[7]腹腔鏡卵巢巧克力囊腫剝除術后卵巢儲備功能及妊娠率的研究[J]. 蘇悅,馬志松. 陜西醫(yī)學雜志. 2016(12)
[8]腦缺血對大鼠大腦皮質中鈣通道Cav1.3表達的影響[J]. 郭森,朱江,王永為,楊松鶴,孔祥玉. 解剖學雜志. 2016 (03)
[9]Nav 1.7與L-型鈣離子通道在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 李慧,王路芳,吳愛娣,季鑫,武昕. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2016(13)
[10]通過環(huán)磷酸腺苷信號通路治療焦慮癥的研究進展[J]. 朱春輝. 中國藥房. 2015(28)
博士論文
[1]AC/cAMP-PKA介導的磷酸化對小鼠胚胎心肌細胞上的基礎L-型鈣離子通道的調控作用[D]. 嚴喜勝.華中科技大學 2011
碩士論文
[1]腹腔鏡卵巢子宮內膜異位囊腫剔除術對卵巢儲備功能影響的研究[D]. 郭舟群.石河子大學 2016
[2]黃連素通過cAMP-PKA-鈣離子通道促進胰島素分泌的初步研究[D]. 張敏.天津醫(yī)科大學 2016
[3]心肌Cav1.3鈣離子通道與snapin蛋白相互作用的鑒定及其功能初探[D]. 翟溯瀾.鄭州大學 2008
本文編號:3515939
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