發(fā)布時(shí)間：2021-11-24 12:03

　　目的:子宮內(nèi)膜異位癥是育齡期婦女的常見疾病,其易“轉(zhuǎn)移”與“復(fù)發(fā)”的惡性行為與惡性腫瘤相似,既往研究發(fā)現(xiàn)鈣離子通道抑制劑可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖與遷移能力,但其是否對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生與發(fā)展具有調(diào)控作用尚不明確。本文將研究:1)了解鈣離子通道Cav1.3在子宮內(nèi)膜異位癥組織中的表達(dá)情況;2)了解鈣離子通道Cav1.3對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥細(xì)胞系中Ishikawa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法:用免疫組織化學(xué)的方法,對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者異位內(nèi)膜及正常增生期內(nèi)膜行免疫化學(xué)染色,比較兩組Cav1.3蛋白的表達(dá)水平;選子宮內(nèi)膜異位癥細(xì)胞系中的Ishikawa細(xì)胞系,siRNA沉默Cav1.3基因,熒光顯微鏡對(duì)該細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率進(jìn)行初步檢測(cè),并用Real-time PCR與Western blot的方法確定沉默效果;CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沉默Cav1.3基因后細(xì)胞增殖能力,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞體外遷徙能力,克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞群體依賴性和增殖能力的改變。結(jié)果:1)Cav1.3蛋白表達(dá)于組織細(xì)胞胞膜中,在正常增生期子宮內(nèi)膜組織（N）中表達(dá)陰性,在子宮內(nèi)膜異位癥組織（C）中呈陽(yáng)性表達(dá),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.... 

【文章來(lái)源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
研究路徑
第一部分 異位癥組織鈣離子通道Cav1.3蛋白表達(dá)情況
    1.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
    1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.5 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第二部分 驗(yàn)證siRNA靶向沉默Cav1.3基因效果
    2.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 材料
        2.2.2 儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
        2.3.2 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染及效率初檢
        2.3.3 Real-timePCR檢測(cè)Cav1.3沉默效率
        2.3.4 WesternBlot檢測(cè)Cav1.3沉默效率
        2.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率
        2.4.2 Real-timePCR
        2.4.3 WesternBlot
    2.5 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第三部分 Cav1.3沉默對(duì)Ishikawa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    3.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 CCK-8細(xì)胞增值實(shí)驗(yàn)
        3.3.2 劃痕實(shí)驗(yàn)
        3.3.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 CCK-8細(xì)胞增值實(shí)驗(yàn)
        3.4.2 劃痕實(shí)驗(yàn)
        3.4.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)
    3.5 實(shí)驗(yàn)小結(jié)
第四部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第五部分 討論
    5.1 異位內(nèi)膜中L型鈣通道Cav1.3蛋白的表達(dá)
        5.1.1 鈣離子通道
        5.1.2 L型鈣通道Cav1.3
        5.1.3 鈣離子與雌激素的非基因轉(zhuǎn)錄效應(yīng)
        5.1.4 內(nèi)異癥病灶組織中Cav1.3蛋白的表達(dá)
        5.1.5 靶向沉默Cav1.3基因?qū)shikawa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    5.2 子宮內(nèi)膜異位癥的治療新方向
    5.3 局限與展望
第六部分 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮略詞表
在學(xué)期間的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]腹腔鏡卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫剔除術(shù)對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能影響的研究[D]. 郭舟群.石河子大學(xué) 2016
[2]黃連素通過(guò)cAMP-PKA-鈣離子通道促進(jìn)胰島素分泌的初步研究[D]. 張敏.天津醫(yī)科大學(xué) 2016
[3]心肌Cav1.3鈣離子通道與snapin蛋白相互作用的鑒定及其功能初探[D]. 翟溯瀾.鄭州大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3515939