目的:本文旨在探討p16/Ki67、p16/mcm2與宮頸癌及癌前病變及高危型HPV E6/E7mRNA感染之間的關(guān)系及對宮頸癌及癌前病變的檢出能力,評價(jià)其代替細(xì)胞學(xué)作為宮頸癌初篩方法的可行性及在HPV陽性人群中的分流能力。方法:選取2016年9月-2017年8月山西省長治市三家三甲醫(yī)院年齡在21-70歲符合入組標(biāo)準(zhǔn),接受宮頸癌篩查的女性人群和門診就診的病人共計(jì)497例。所有入組的研究對象均進(jìn)行HPV E6/E7 mRNA檢測、液基細(xì)胞學(xué)檢測（LBC）、p16/Ki67雙染與p16/mcm2雙染檢測。結(jié)果:1)p16/Ki67表達(dá)與宮頸癌及癌前病變和HPV E6/E7 mRNA表達(dá)的關(guān)系:隨著細(xì)胞學(xué)診斷級別的上升p16/Ki67雙染檢測的陽性率呈上升趨勢(χ²=139.0,P_trend<0.001);LBC與p16/Ki67陽性率均隨著宮頸病變程度的加深而呈增高趨勢(χ²=46.6,P_trend<0.001,χ²=16.8,P_trend<... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PANTHER系統(tǒng)試劑重構(gòu)過程

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文連接羊抗小鼠IgG聚合物識別已經(jīng)連接上的鼠抗人p16抗體，辣根過氧化酶連接羊抗兔IgG聚合物識別已經(jīng)連接上的兔抗人Ki67抗體；第三，加入相應(yīng)的反應(yīng)底物，使得辣根過氧化物酶催化相應(yīng)顯色液中的過氧化氫進(jìn)行分解，使聯(lián)苯胺通過氧化成聯(lián)苯亞胺，使細(xì)胞薄片中相應(yīng)的抗原位點(diǎn)上出現(xiàn)相應(yīng)的著色，同時(shí)聚合物上堿性磷酸酶部分催化底物水解成酚類和磷酸。酚和無色的重氮鹽（顯色原）結(jié)合，使組織切片中抗原位點(diǎn)上出現(xiàn)紅色著色。最后對標(biāo)本進(jìn)行復(fù)染和樹脂封片，在顯微鏡下觀察下脫落細(xì)胞內(nèi)的特定抗原是否表達(dá)，從而判定雙染結(jié)果。

圖3.p16/Ki67免疫細(xì)胞化學(xué)雙染檢測試劑盒各組分Figure3 Composition of p16/Ki67 immunocytochemical dual staining kit體檢測步驟：宮頸脫落細(xì)胞固定。將己制備好的宮頸涂片從4°冰箱中取出置于95%酒0分鐘后，用自來水沖洗1分鐘以上。將抗原修復(fù)液隔水放入水浴鍋中，加熱至95℃；將固定好的細(xì)胞涂片熱的染色架上，放入抗原修復(fù)液中，修復(fù)15分鐘后，自然晾干，冷卻至水沖洗1分鐘后，再用PBS溶液對宮頸涂片進(jìn)行沖洗每次沖洗3分鐘，總加入相應(yīng)的阻斷劑，清除細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶。除去相應(yīng)PBS緩沖溶液過氧化物酶阻斷劑，在常溫下（15-30℃）于孵育盒內(nèi)孵育10分鐘；再用對宮頸涂片進(jìn)行沖洗，每次均需沖洗至少3分鐘，需進(jìn)行兩次沖洗。加入相應(yīng)抗體。首先仍是除去PBS溶液，再加入100ul即用型組合一抗15℃-30℃）孵育60分鐘，再用PBS溶液對宮頸涂片進(jìn)行沖洗每次沖洗3


本文編號：3515330