慢病毒介導(dǎo)的DKC1基因沉默對人宮頸癌HeLa細(xì)胞放射敏感性的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-11-20 07:05
目的探討降低角化不良蛋白基因(DKC1基因)表達(dá)對人宮頸癌HeLa細(xì)胞放射敏感性的影響。方法以慢病毒為載體通過shRNA技術(shù)建立DKC1基因低表達(dá)的細(xì)胞模型,并利用RT-PCR、Western blot驗(yàn)證干擾效率。將細(xì)胞分為干擾組、空白對照組和陰性對照組,通過端粒重復(fù)序列擴(kuò)增酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TRAP-ELISA法)檢測端粒酶活性,實(shí)時(shí)PCR檢測相對端粒長度,克隆形成實(shí)驗(yàn)計(jì)算克隆形成率,并利用單擊多靶模型擬合細(xì)胞存活曲線、計(jì)算放射生物學(xué)相關(guān)參數(shù)(D0、Dq、N、SF2)及放射增敏比(SER)。結(jié)果以慢病毒為載體的DKC1干擾序列(Lv-shDKC1)轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞后,與空白對照組相比,干擾組DKC1 mRNA及蛋白表達(dá)水平均明顯下降,其表達(dá)抑制率分別為(71.330±4.112)%(t=25.53,P<0.05)、(35.520±3.804)%(t=4.833,P<0.05)。與空白對照組及陰性對照組相比,干擾組端粒酶活性從0.900±0.044、0.897±0.031降到0.713±0.021(F=31.44,P<0.05),相對端粒長度從4.233±0.306...
【文章來源】:中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志. 2020,40(08)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:5 頁
本文編號:3506816
【文章來源】:中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志. 2020,40(08)北大核心CSCD
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