宮頸癌是死亡率僅次于乳腺癌的第二大婦科癌癥。人乳頭瘤病毒HPV（human papilloma virus）的持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸癌的主要原因,其中約70%的宮頸癌是由于高危型HPV-16或HPV-18引起的。順鉑是臨床上最常用的化療藥物,治療過程中引起的順鉑抗性會導(dǎo)致化療失敗。越來越多的報道證實(shí)miRNA介導(dǎo)了癌癥對化療藥物的敏感性。miR-106b/93,位于miR-106b-25簇,在許多癌癥中都發(fā)現(xiàn)其具有癌基因的功能,然而,miR-106b/93在宮頸癌中的功能鮮為人知。利用實(shí)時定量PCR,我們檢測發(fā)現(xiàn)位于同一基因簇的miR-106b, miR-93以及miR-25在宮頸癌組織以及宮頸癌細(xì)胞系的表達(dá)都高于正常宮頸組織。我們發(fā)現(xiàn)HPV-18陽性宮頸癌細(xì)胞系HeLa比HPV-16陽性宮頸癌細(xì)胞系CaSki對順鉑更為敏感,而miR-106b, miR-93以及miR-25在CaSki中的表達(dá)水平都要高于HeLa。在順鉑處理后,miR-106b, miR-93和miR-25都呈現(xiàn)不同程度的下調(diào)表達(dá)。過表達(dá)miR-106b/93可以降低宮頸癌細(xì)胞系HeLa和CaSki對順鉑的敏感性；反之,... 

【文章來源】：復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖５過表達(dá)ｍ化９３／１０化和敲除ｍｉＲ－９３／１０化對ＨｅＬａ和ＣａＳｋｉ順鉆敏感性的影響??

??細(xì)胞細(xì)胞增殖顯著地上調(diào)（Ｐ＜〇．〇５，圖６Ｅ）。??Ａ?Ｂ??＾?ｌ－Ｓｉ?ｍｉＲ－９３?ｍｉｍｉｃ?ｍｉＲ－９３?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ??１：：?ｎｆｌｎｎｉｉ?Ｉ與ｎ?ｈ?ｎ?ｎ?ｍ可?ｒｉ腦??１?化６?ｒ＇６?ｊｐ．４４－／．??．＞〇，，?化－、＇?Ｍｒ．—；．…寸．？＊古－￣：５一￣＂：？??巧＂一?．二?心＜?（ＶＩ？？??之?０?０?乏?〇．〇｜?Ｉ?．?Ｉ?．?Ｉ?．?Ｉ?．?Ｉ?．?？?．?Ｉ?．?？?．?ｔｎｉＲ－１０６?ｍｉｍｉｃ?ｍｌＲ－１０６?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ??榮、磯癸冷參祭笑、滬：ｊ?４．６５％?：ｊ?１＾：。％；??＝叫…＝１，１?０％．ｎ％?２??１?廣Ｉ?Ｉ?一?？?？?托’’？去，．古??蘭?０．９?查?０．９’?ｔ?ｐｉ，?ｍ化－ＮＣ?ｍｉｍｉｃ?ｍｉＲ－ＮＣ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ??２?〇?．‘＇??ＩＳ－??Ｉ?，，＾?１？—???Ｓ?０。?ｇ?０．６?Ｖ?０．９３％?，?０．９６％??｜（Ｕ．?Ｉ?０．３．?＾ｇ—群—ｉ—??Ｓ?０．０Ｉ．ＬＩ?Ｕ?Ｌｉ?Ｌｉ－?２?０．０Ｉ?．ＩＪ?Ｕ．Ｕ?Ｕ．Ｕ．－．?ｊ?ｊｐ．８３％?ｊｊｐ．４２％??ｃ??成々冷－、＊々?於、?＂，?

５．?ＲＡＤ１和ＴＰ５３ＩＮＰ１是ｍ瓜－１０６／９３的共同觀基因??ｍｉＲ－１０化和ｍｉＲ－９３不僅Ｗ同一順反子轉(zhuǎn)錄，且擁有相同的與靴基因結(jié)合序??列（圖７Ａ）。通過ｍｉＲａｎｄａ和ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ數(shù)據(jù)庫預(yù)測，我們預(yù)測出了許多??ｍｉ民－１０６ｂ／９３的共同禪基因。經(jīng)過驗(yàn)證，ＲＡＤ１和ＴＰ巧ＩＮＰ１是ｍｉＲ－１０６ｂ和ｍｉ民－９３??的共同報基因。ＲＡＤ１的民包含Ｈ個潛在的ｍｉＲ－１０６ｂ／９３的結(jié)合位點(diǎn)，包括位??點(diǎn)３］１，３０１７，３２５２?（圖７Ａ）。經(jīng)過篩選，ｍ化－１０６ｂ／９３對ＲＡＤ１的作用位點(diǎn)可能??是位點(diǎn)３１１。分別過表達(dá)或敲除ｍ化－１０６ｂ／９３后，ＷＮＣ作為對照，我們發(fā)現(xiàn)分別??過表達(dá)ｍｉＲ－Ｗ和ｍｉＲ－］０化后，ｐｓｉＣＨＥＣＫ２－ＲＡＤｌ－３１１－ｗｔ相對的化？巧光素酶??的活性分別下調(diào)２５％．?５％；反之，敲除ｍｉＲ－９３或ｍｉＲ－１０化后，相對于ＮＣ，??ｐｓｉＣＨＥＣＫＳ－ＲＡＤｌ１１?－ｗｔ相對的齡滅〇巧光素酶澈性分別升高１１０％和４〇％。缺??失突變ｐｓｉＣＨＥＣＫ２－ＲＡＤｌ－３１１－ｗｔ上ｍｉＲ－１０６ｂ／９３的結(jié)合位點(diǎn)后，過表達(dá)或敲除??ｍｉＲ－１０６ｂ／９３后－發(fā)現(xiàn)Ｒｅｎｉｌｌａ的巧光素酶的相對活性不再發(fā)生變化（圖７Ｂ和７Ｃ）。??Ａ?Ｂ?Ｃ??Ｉ?山么扯公迎?ｉ


本文編號：3498210