目的:探討miR-520a-3p調(diào)控宮頸癌細(xì)胞因子分泌的分子機(jī)制。方法:通過Target Scan Human分析miR-520a-3p與NF-κB復(fù)合體亞基RELA的匹配情況,然后通過熒光素酶報告系統(tǒng)檢測miR-520a-3p是否靶向NF-κB復(fù)合體亞基RELA;使用LPS刺激宮頸癌HELA細(xì)胞后,將miR-520a-3p mimics與轉(zhuǎn)染試劑混合后滴入HELA細(xì)胞中,此為過表達(dá)組;將miR-520a-3p inhibitor與轉(zhuǎn)染試劑混合后滴入HELA細(xì)胞中,此為敲低組,通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測過表達(dá)組和敲低組GCSF,GM-CSF,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-9,IL-10,IL-12 p40,IL-12 p70,IL-13,IL-17,IFN-γ,MCP-1,MCP-5,RANTES,TNFα的表達(dá)水平。每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。結(jié)果:miR-520a-3p靶向RELA的3’UTR; LPS激活NF-kB信號通路后,宮頸癌HELA細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子GCSF,GM-CSF,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-9,IL-10,IL-12 p... 

【文章來源】：中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染與LPS處理
    1.3 RNA抽取與實(shí)時熒光定量PCR
    1.4 雙熒光素酶報告系統(tǒng)試驗(yàn)
    1.5 免疫印跡試驗(yàn)
    1.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
    1.7 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 miR-520a-3p過表達(dá)后，野生型和突變型miR-520a-3p的3’UTR的熒光素酶活性
    2.2 過表達(dá)miR-520a-3p對宮頸癌細(xì)胞HELA因子分泌的影響
    2.3 敲低miR-520a-3p對宮頸癌細(xì)胞HELA因子分泌的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TGF-β1對Aβ1-42誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元-小膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)體系中細(xì)胞因子表達(dá)和分泌的影響[J]. 方小霞,周易,孫高林,邱一華,彭聿平.  中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2018(05)
[2]Incidence and mortality of cervical cancer in China,2013[J]. Bingbing Song,Chao Ding,Wangyang Chen,Huixin Sun,Maoxiang Zhang,Wanqing Chen.  Chinese Journal of Cancer Research. 2017(06)
[3]不同分期宮頸癌患者外周血Treg和相關(guān)細(xì)胞因子差異分析[J]. 黃群歡,洪嶺,陶春林,黃旭紅.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2017(09)
[4]卒中后抑郁與血清炎性細(xì)胞因子水平及神經(jīng)功能損害的相關(guān)性分析[J]. 李平,張巧蓮,李雙英.  中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2017(02)



本文編號：3483901