發(fā)布時間：2021-10-19 18:42

　　目的:探討HPV16病毒引起新疆維吾爾族和漢族婦女宮頸癌的分子進化規(guī)律,分析新疆維吾爾族和漢族婦女宮頸癌HPV16全基因組基因多態(tài)性及其與疾病發(fā)生與發(fā)展的關(guān)系,分析HPV16 E6、E7基因多態(tài)性位點對宮頸癌進展的作用。方法:（1）提取188例新疆維吾爾族和漢族女性HPV16陽性感染的宮頸組織樣本中的DNA,PCR擴增基因,并進行基因序列測定。將HPV16全基因組序列與歐洲型標準序列進行比對,并建立其進化樹。（2）在宮頸癌C33A細胞中分別穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HPV16 E6 295T/350T-GV230原型、HPV16 E6295G/350G-GV230和295T/350G-GV230突變型表達載體,HPV16 E7原型647A-GV144、HPV16 E7突變型647G-GV144以及HPV16 E6+E7原型E6-178T/E7-647A-GV144、HPV16 E6+E7突變型E6-178G/E7-647G-GV144重組表達載體。（3）于裸鼠的左后腿皮下接種E6不同多態(tài)性位點重組表達載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的C33A細胞。每2-3天觀察并測量裸鼠體重以及成瘤瘤體的大小,處死裸鼠取得瘤體后,稱取各組... 

【文章來源】：石河子大學新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

HPV16E6質(zhì)粒圖譜

新疆維吾爾族和漢族宮頸癌組織HPV16全基因組多態(tài)性及致癌蛋白E6、E7功能研究11圖2HPV16E6、E7重組表達載體示意圖Fig.2SchematicdiagramofrecombinantexpressionvectorofHPV16E6/E72.4.2引物的設(shè)計HPV16E6、E7及E6、E7重組載體引物由上海吉凱基因公司設(shè)計合成，詳細信息（見表3、4）。表3HPV16E6引物信息Table3HPV16E6primerinformation基因名稱序列HPV16E6原型-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6原型-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTCHPV16E6-G350突變-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6-G350突變-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTCHPV16E6-G295/G350突變-P1TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGCACCAAAAGAGAACTGCAATGHPV16E6-G295/G350突變-P2GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTCAGCTGGGTTTCTCTACGTGTTC表4HPV16E7、E6+E7重組載體引物序列信息Table4PrimerinformationofHPV16E6/E7recombinantvector基因名稱序列HPV16E7原型-P1CATGGTCCTGCTGGAGTTCGTG

新疆維吾爾族和漢族宮頸癌組織HPV16全基因組多態(tài)性及致癌蛋白E6、E7功能研究19驗，P＜0.05被認為有統(tǒng)計學差異。結(jié)果（Results）1基因組DNA提取結(jié)果將所收集的181例新疆維吾爾族和漢族婦女宮頸組織進行編號，然后提取宮頸組織樣本基因組DNA，繼而在0.7%瓊脂糖凝膠中進行電泳，在凝膠成像系統(tǒng)中檢測并記錄結(jié)果，得到48例組織的DNA條帶清晰完整，可以用于進一步的實驗(圖3)。圖3提取組織樣本DNA電泳圖Fig3TheelectrophoresisreslutsoftissuesamplesDNA2HPV16感染檢測結(jié)果2.1HPV16病毒感染PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果通過PCR方法檢測宮頸組織中HPV16病毒的感染情況，PCR產(chǎn)物用2%的瓊脂糖凝膠進行電泳加以檢測，曝光結(jié)果顯示，在268bp處可見明亮而整齊的目的條帶，這一結(jié)果說明該組織樣本感染HPV16病毒，而未感染HPV16的組織樣本則不出現(xiàn)條帶(圖4)，以ddH2O作為陰性對照（NC），明確感染類型的DNA樣本作為陽性對照(PC)。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]兩個腫瘤相關(guān)基因功能和作用機制的探索與研究[D]. 詹泰嵐.華中科技大學 2013

碩士論文
[1]新疆維吾爾族和漢族宮頸癌HPV16 E6基因多態(tài)性及功能分析[D]. 潘貞貞.石河子大學 2018
[2]HPV16E7,E5序列多態(tài)性與新疆地區(qū)維，漢婦女宮頸癌及癌前病變的相關(guān)性研究[D]. 楊丹.石河子大學 2014
[3]青島地區(qū)宮頸上皮內(nèi)瘤變中HPV16 E6和E7多態(tài)性分析[D]. 王玉潔.青島大學 2013
[4]不同階段宮頸上皮病變組織中人乳頭瘤病毒16型轉(zhuǎn)化基因E7和E5序列多態(tài)性分析[D]. 王玉婷.青島大學 2011



本文編號：3445412