目的探討小干擾RNA（siRNA）沉默鞘磷脂合酶1（SMS1）表達(dá)對卵巢癌HO8910細(xì)胞增殖、凋亡及核因子-κB（NF-κB）通路的影響。方法將體外培養(yǎng)的人卵巢癌HO8910細(xì)胞隨機分成空白組（不進(jìn)行轉(zhuǎn)染）、對照組（轉(zhuǎn)染無義序列慢病毒載體）和實驗組（轉(zhuǎn)染SMS1 siRNA慢病毒載體）。3組細(xì)胞均在37℃、5%CO₂飽和濕度條件下用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。轉(zhuǎn)染48 h后,用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測細(xì)胞中SMS1 mRNA的表達(dá)情況,用噻唑藍(lán)法檢測細(xì)胞的增殖情況,用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的凋亡情況,用蛋白質(zhì)印跡法檢測細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中NF-κB的表達(dá)情況。結(jié)果培養(yǎng)48 h后,空白組、對照組和實驗組SMS1 mRNA表達(dá)水平分別為1.03±0.09,1.04±0.10和0.51±0.06,OD值分別為1.50±0.11,1.46±0.12和0.87±0.10,細(xì)胞凋亡率分別為（7.18±1.60）%,（7.07±1.54）%和（20.76±3.21）%,細(xì)胞核NF-κB蛋白表達(dá)水平分別為0.74±0.08,0.76±0.08和0.40±0.06,細(xì)... 

【文章來源】：中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(22)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞分組與處置方法
        2.3 主要觀察指標(biāo)
            2.3.1 用qRT-PCR檢測2組細(xì)胞中SMS1 mRNA的表達(dá)情況[5]
            2.3.2 用MTT法檢測卵巢癌細(xì)胞HO8910的增殖情況[5]
            2.3.3 用Annexin V/PI雙染法檢測卵巢癌細(xì)胞HO8910的細(xì)胞凋亡情況[5]
            2.3.4 用Western Blotting檢測卵巢癌細(xì)胞HO8910中NF-κB蛋白的表達(dá)水平[5]
        2.4 次要觀察指標(biāo)
            2.4.1 用流式細(xì)胞術(shù)檢測卵巢癌細(xì)胞HO8910的細(xì)胞周期[5]
            2.4.2 用Western Blotting檢測卵巢癌細(xì)胞HO8910中Bax、Bcl-2、Caspase-3、IKK和Cyclin D1蛋白的表達(dá)水平[5]
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 轉(zhuǎn)染后各組卵巢癌細(xì)胞中SMS1 mRNA表達(dá)水平的比較
    2 SMS1 siRNA對卵巢癌細(xì)胞增殖情況的影響
    3 SMS1 siRNA對卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響
    4 SMS1 siRNA對卵巢癌細(xì)胞周期的影響
    5 SMS1 siRNA對卵巢癌細(xì)胞凋亡通路相關(guān)蛋白、卵巢癌細(xì)胞NF-κB通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3434974